Sumários
Técnicas Electroforéticas (II)
17 Novembro 2016, 17:00 • Carlos Miguel Ribeiro da Silva Farinha
Meios de suporte
•Electroforese em PapelAmido
Agar
Agarose
Poliacrilamida
Procedimentos fundamentais - aplicação da amostra, corrida e detecção
Técnicas Electroforéticas (I)
16 Novembro 2016, 18:00 • Carlos Miguel Ribeiro da Silva Farinha
Princípios gerais
Factores
que afectam a velocidade de
migração.
- a amostra (carga, tamanho & forma)
- o campo eléctrico (efeito de Joule)
- o tampão de electroforese
- o meio de suporte
Cromatografia de Afinidade
10 Novembro 2016, 17:00 • Carlos Miguel Ribeiro da Silva Farinha
• Princípios básicos
• Equilíbrio de ligação ligando-proteína
• Etapas da cromatografia de afinidade
• A matriz
• O ligando
• A importância dos braços espaçadores
• Estratégias de eluição
• Exemplos
Cromatografia de Exclusão Molecular
9 Novembro 2016, 18:00 • Carlos Miguel Ribeiro da Silva Farinha
Princípios básicos
• Mecanismo de separação
• Normalização do comportamento de eluição
• Curvas de selectividade
• Propriedades dos géis
• Modos de separação:
Fraccionamento com elevada resolução
Separação de grupos
• Cuidados práticos
• Aplicações
Cromatografia de Troca Iónica (IEX)
3 Novembro 2016, 17:00 • Ana Isabel Abrantes Coutinho
Princípios básicos da cromatografia de troca iónica.
Curva de titulação de uma proteína.
Propriedades da matriz: tipo, força e capacidade do permutador.
Escolha das condições experimentais a usar: escolha do permutador, composição do tampão de eluição e estratégias de eluição. Preparação da amostra.
Etapas gerais de uma cromatografia de troca iónica.
Exemplos.