Hibridação in situ em embriões de galinha - revelação da hibridação in situ

17 Abril 2018, 08:00 • Solveig Thorsteinsdottir

Revelação das hibridações in situ da aula anterior segundo o seguinte protocolo:

Dia 4 da hibridação in situ

1.  Lavar 2 vezes 10 min em NTMT no “roller” a temperatura ambiente

Revelação (incubação com um substrato da fosfatase alcalina – o “BM Purple”):

2.  Colocar em BM Purple e incubar a temperatura ambiente no escuro até se ver claramente uma coloração roxa.
3.  Quando tiver suficientemente revelado (o tempo de revelação depende da sonda...), retirar o BM Purple e lavar 3 vezes em PBT
4.  Guardar em PBT com azida.