Aula prática 2 - embrião de galinha
21 Março 2023, 08:00 • Solveig Thorsteinsdottir
Realização por parte dos alunos da colheita de embriões de galinha de 2 e 3 dias partir de ovos galados incubados. Observação dos embriões a lupa e determinação do estádio HH. Fixação dos embriões em fixador 4% PFA em PBS
Protocolo
da aula:
OBSERVAÇÃO
DE EMBRIÕES DE GALINHA (2-3 dias) E A SUA FIXAÇÃO
1.
Lava
o material cirúrgico com álcool e deixa secar.
2.
Retira
um ovo da incubadora, orienta-o com o lado ponteagudo para cima e fura a parte
redonda (parte de baixo) com uma pinça grossa.
3.
Corta
a casca na parte ponteagúda com uma tesoura grossa e retira “a tampa” do ovo.
Abre o suficiente para ver a gema e o embrião.
4.
Se o
embrião for visível, coloca o ovo num suporte, retira o embrião da gema e
coloca-o numa caixa de Petri grande (diâmetro 10 cm) com “Phosphate Buffered
Saline” (PBS). Se o embrião não for visível, coloca o conteúdo do ovo numa
caixa de Petri grande e procura o embrião. Método para tirar o embrião
da gema: corta a membrana da gema à volta do embrião e remove o
embrião com uma colher de café.
5.
Observa
o embrião na lupa. Remove a gema a volta do embrião e, utilizando uma pipeta de
Pasteur de plástico com a ponta cortada, transfere-o para uma caixa de Petri
com PBS limpo. Quando tiver completamente livre de gema, transfere o embrião
para uma caixa de Petri com fundo preto.
6.
Observa
o embrião à lupa e determina o estádio HH, utilizando a tabela de
desenvolvimento de Hamburger e Hamilton. Consulta tanto as imagens de embriões
como a descrição de cada estádio para determinar com rigor o estádio do
embrião.
7.
Leva
o embrião para a hotte e transfere para um tubo com fixador 4% PFA em PBS.