Sumários
13 Dezembro 2022, 11:30
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Carlos Miguel Ribeiro da Silva Farinha
Aula de dúvidas
12 Dezembro 2022, 16:00
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Carlos Miguel Ribeiro da Silva Farinha
Métodos para Estudo da Regulação da Expressão dos Genes - II
lTécnicas de microscopia:
vFRET (Fluorescence resonance energy transfer): "photobleaching" do aceitador e emissão sensibilizada.
vFRAP (Fluorescence recovery after photobleaching).
vFLIP (Fluorescence loss in photobleaching)
lRNA interference (RNAi): mecanismo natural e RNAi e silenciamento de genes em mamíferos mediado por RNAi
lsiRNAs como ferramentas para o estudo da função dos genes; screensem microarrays de siRNAs; microscopia de fluorescência em high-throughput. Exemplo dum ensaio.
6 Dezembro 2022, 11:30
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Carlos Miguel Ribeiro da Silva Farinha
Métodos para Estudo da Regulação da Expressão dos Genes
lEstudo da regulação transcricional: gel-mobility shift assay; DNA footprinting.
lExemplo de estudo da atividade de promotores com genes repórter: o gene CAT e o gene luciferase.
lSistemas "Tet-on" e "Tet-off".
lExperiências de pulse-chase com radioisótopos.
lO uso de GFP como marcador de proteínas.
lO sistema do duplo híbrido em levedura.
5 Dezembro 2022, 16:00
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Carlos Miguel Ribeiro da Silva Farinha
A Base Molecular e Funcional da Fibrose Quística
lFibrose Quística (FQ): Fenótipo Clínico e Fisiopatologia.
lFQ: Do Gene à Proteína.
lDiferentes Mutações. Classes de Mutações:
lAbordagens terapêuticas por classe de mutação.
29 Novembro 2022, 11:30
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Carlos Miguel Ribeiro da Silva Farinha
Sorting de Proteínas
lSorting (distribuição) intracelular de proteínas. Sinais de sorting.
lA via secretora dos Eucariotas. Sequência do sinal: targeting de proteínas para o reticulo endoplasmático (RE).
lInserção de proteínas na membrana do RE. Ligação de proteínas à membrana do RE. Orientação topológica.
lTranslocação de proteínas em Procariotas.
lGlicosilações e sorting no RE e no Golgi.
lTransporte vesicular. Formação e fusão de vesículas de transporte.
lAs proteínas Rab e o tráfego vesicular.