Resolução da série de problemas II

9 Outubro 2018, 10:30 • Ana Isabel Abrantes Coutinho

Resolução da2ª série de problemas

Continuação da introdução à extinção de fluorescência (quenching)

9 Outubro 2018, 09:30 • Ana Isabel Abrantes Coutinho

Continuação da introdução à extinção de fluorescência (quenching).

Quenching estático (modelo da esfera de acção e formação de complexos no estado fundamental).

Sistemas complexos:  (i) extinção dinâmica e estática em simultâneo; (ii) sistemas heterogéneos. Gráfico de Lehrer.

Exemplos de aplicações de estudos de extinção de fluorescência em Bioquímica.

Medidas de fluorescência resolvidas no tempo. Introdução à extinção de fluorescência.

2 Outubro 2018, 12:00 • Ana Isabel Abrantes Coutinho

Medidas de fluorescência resolvidas no tempo.

Relação entre as medidas de fluorescência em estado estacionário e resolvidas no tempo.

Realização de medidas de intensidade de fluorescência resolvidas no tempo, I(t):  Fluorimetria pulsada – técnica de cronometragem do fotão único (SPT)

Cinética de emissão de fluorescência: decaimento mono-exponencial e tempo de vida do estado excitado.

Decaimentos de intensidade de fluorescência multi-exponenciais.

Introdução à extinção de fluorescência (quenching).

Quenching dinâmico (extinção de fluorescência colisional).  Dedução da equação de Stern-Volmer. Significado físico da constante de Stern-Volmer. Determinação da eficiência de quenching.

Resolução da série de problemas I

2 Outubro 2018, 10:30 • Ana Isabel Abrantes Coutinho

Resolução da 1ª série de problemas

Sondas e fluróforos usados em Bioquímica

2 Outubro 2018, 09:30 • Ana Isabel Abrantes Coutinho

Introdução às principais sondas e fluoróforos usados em Bioquímica.

Fluoróforos intrínsecos e extrínsecos. Conjugação química de proteínas: estratégias gerais de derivatização química de resíduos de Cys e de grupos amina. Cuidados gerais a observar.  

Fluoróforos codificados geneticamente: proteínas fluorescentes no visível (GFP e mutantes).

A importância da autofluorescência de células e tecidos nos estudos in vivo.

Alguns exemplos de aplicações em estudos bioquímicos.