2. Manipulação dos ácidos nucleicos: enzimologia, isolamento, quantificação e marcação
24 Fevereiro 2017, 08:00 • Rita Zilhão
2. Manipulação dos ácidos nucleicos: enzimologia, isolamento, quantificação e marcação
Breve resumo histórico do desenvolvimento da clonagem molecular. Noção de clonagem molecular e de clone molecular. Enzimologia do DNA recombinante. Enzimas de restrição. Enzimas de restrição de tipo II. Mapa de restrição. Importância dos sistemas de restrição/modificação em clonagem molecular.
Isoesquizómeros. Enzimas de modificação: nucleases, polimerases, fosfatases e cinases. DNA ligases. Propriedades físicas e químicas dos ácidos nucleicos e os seus métodos de visualização e quantificação. Fundamento de alguns processos de isolamento e purificação dos ácidos nucleicos. Métodos de quantificação dos ácidos nucleicos baseados na espectrofotometria e em matrizes (agarose e poliacrilamida) sujeitas a electroforese.