3. Metodologia da manipulação génica e clonagem molecular geral

3 Março 2017, 08:00 • Rita Zilhão

3. Metodologia da manipulação génica e clonagem molecular geral

Clonagem molecular: significado, objectivos e etapas. O papel dos ácidos nucleicos na clonagem molecular. Tipo de hospedeiros: hospedeiros procarióticos e principais hospedeiros eucarióticos (células animais e vegetais, linhas celulares, culturas primárias e tecidos).

Construção de moléculas de DNA recombinante. Preparação de DNA vector e DNA dador. Métodos de produção de fragmentos de DNA e de modificação de extremidades (DNA polimerases, fosfatases de DNA, transferase terminal; adição de linkers e adaptadores). Estratégias de ligação de DNA vector e DNA dador (ligases de DNA). Clonagem dirigida e clonagem não dirigida.