1. Clonagem da região reguladora de um gene num vetor de expressão Objetivos da clonagem molecular Preparação dos vetores de clonagem e do fragmento de DNA a clonar
3 Março 2020, 17:00 • Rita Zilhão
Engenharia Genética geral
1. Clonagem da região reguladora de um gene num vetor de expressão
Objetivos da clonagem molecular
Preparação dos vetores de clonagem e do fragmento de DNA a clonar
Digestão dos vetores pNM480/481/482 com as enzimas de restrição EcoRI/PstI.
Eletroforese em gel analítico Eletroforese em gel preparativo e purificação dos fragmentos EcoRI/PstI de 740 pb, a clonar nos vetores pNM480/481/482.
Eletroforese em gel preparativo do plasmídio recombinante pRZA18 digerido com EcoRI/PstI e purificação do fragmento de 740 pb, a clonar dos vetores pNM480/481/482.
Visualização em gel de agarose dos produtos de digestão dos vetores e do fragmento purificado, e avaliação das quantidades relativas de DNA (vetores e fragmento) a utilizar na clonagem.
CONCEITOS: purificação e armazenamento do DNA