Sumários

Extração de DNA plasmídico em pequena escala (Miniprep)

18 Novembro 2022, 14:00 • Susana Maria Traquete Serrazina

Regras para conduzir um trabalho experimental. Material biológico – plasmídeo pJET 1.2 + inserto 2300 bp. Extração de DNA plasmídico em pequena escala (Miniprep).

PCR e Digestão com Enzimas de Restrição

18 Novembro 2022, 14:00 • Mónica Guita Sebastiana

Quantificação de DNA plasmidico no NanoDrop e avaliação do grau de pureza. Amplificação do inserto por PCR. Digestão do DNA plasmidico com enzimas de restrição.

Fim do tema Proteínas. Início do tema Replicação do DNA

18 Novembro 2022, 13:00 • Rita Zilhão

Noções gerais sobre a degradação das proteínas: a ubiquitinação e o proteossoma; os lisossomas. Significados da N-end rule e da sequência PEST. Tráfico proteico e sinalização.

Replicação do DNA. Princípios gerais: semi-conservativa, sentido 5´-3’, o primer de RNA e a necessidade da extremidade 3’OH para o início da replicação pela DNA polimerase. Noção de cadeia líder e cadeia atrasada, os fragmentos de OKazaki. Revisão dos princípios gerais da replicação do DNA. Princípios gerais: semi-conservativa, sentido 5´-3’, o primer de RNA e a necessidade da extremidade 3’OH para o início da replicação pela DNA polimerase. Noção de cadeia líder e cadeia atrasada, os fragmentos de OKazaki. Principais enzimas envolvidas na replicação do DNA: DNA polimerase, primase, helicases, SSB e topoisomerases. A síntese simultânea da cadeia líder e da cadeia atrasada. A replicação do DNA em procariotas. As atividades das DNA polimerases I, II, III, IV e V de E. coli

Extração de DNA plasmídico em pequena escala (Miniprep)

17 Novembro 2022, 11:30 • Susana Maria Traquete Serrazina

Regras para conduzir um trabalho experimental. Material biológico – plasmídeo pJET 1.2 + inserto 2300 bp. Extração de DNA plasmídico em pequena escala (Miniprep).

PCR e Digestão com Enzimas de Restrição

17 Novembro 2022, 11:30 • Filipa Monteiro

Quantificação de DNA plasmidico no NanoDrop e avaliação do grau de pureza. Amplificação do inserto por PCR. Digestão do DNA plasmidico com enzimas de restrição.