Sumários

PCR e Digestão com Enzimas de Restrição

18 Novembro 2022, 14:00 • Mónica Guita Sebastiana

Quantificação de DNA plasmidico no NanoDrop e avaliação do grau de pureza. Amplificação do inserto por PCR. Digestão do DNA plasmidico com enzimas de restrição.

Extração de DNA plasmídico em pequena escala (Miniprep)

18 Novembro 2022, 14:00 • Susana Maria Traquete Serrazina

Regras para conduzir um trabalho experimental. Material biológico – plasmídeo pJET 1.2 + inserto 2300 bp. Extração de DNA plasmídico em pequena escala (Miniprep).

Fim do tema Proteínas. Início do tema Replicação do DNA

18 Novembro 2022, 13:00 • Rita Zilhão

Noções gerais sobre a degradação das proteínas: a ubiquitinação e o proteossoma; os lisossomas. Significados da N-end rule e da sequência PEST. Tráfico proteico e sinalização.

Replicação do DNA. Princípios gerais: semi-conservativa, sentido 5´-3’, o primer de RNA e a necessidade da extremidade 3’OH para o início da replicação pela DNA polimerase. Noção de cadeia líder e cadeia atrasada, os fragmentos de OKazaki. Revisão dos princípios gerais da replicação do DNA. Princípios gerais: semi-conservativa, sentido 5´-3’, o primer de RNA e a necessidade da extremidade 3’OH para o início da replicação pela DNA polimerase. Noção de cadeia líder e cadeia atrasada, os fragmentos de OKazaki. Principais enzimas envolvidas na replicação do DNA: DNA polimerase, primase, helicases, SSB e topoisomerases. A síntese simultânea da cadeia líder e da cadeia atrasada. A replicação do DNA em procariotas. As atividades das DNA polimerases I, II, III, IV e V de E. coli

Extração de DNA plasmídico em pequena escala (Miniprep)

17 Novembro 2022, 11:30 • Susana Maria Traquete Serrazina

Regras para conduzir um trabalho experimental. Material biológico – plasmídeo pJET 1.2 + inserto 2300 bp. Extração de DNA plasmídico em pequena escala (Miniprep).

PCR e Digestão com Enzimas de Restrição

17 Novembro 2022, 11:30 • Filipa Monteiro

Quantificação de DNA plasmidico no NanoDrop e avaliação do grau de pureza. Amplificação do inserto por PCR. Digestão do DNA plasmidico com enzimas de restrição.