Sumários
Imunidade inata (cont.)
19 Março 2024, 12:00 • Iris Caramalho
Resposta inflamatória: Recrutamento de fagócitos para locais de infeção; Sequência de eventos na migração de leucócitos do sangue para os locais de infeção;
Ações locais e sistémicas de citocinas na inflamação;
Citocinas da imunidade inata;
Respostas antivirais;
Funções mediadas por IFN-I;
Ação biológica de membros da família IFN-I;
IFN-I na resposta protetora contra infeções virais;
Estimulação da imunidade adquirida pela resposta imunológica inata
Citocinas produzidas por células da imunidade inata e seu papel na diferenciação de linfócitos T CD4+ naive
Controlo da duração e extensão da resposta inflamatória
Mecanismos de controlo da extensão da resposta imunológica inata
Visão global da resposta imunológica inata
TP3-Técnicas imunológicas em investigação
19 Março 2024, 08:30 • Teresa Pais
Métodos para estudo das células do sistema imune: isolamento e ensaios funcionais.
Imunidade inata (cont.)
18 Março 2024, 11:00 • Iris Caramalho
Células dendríticas
Células linfoides inatas (ILCs)
Subtipos de ILCs e sua função na resposta imunológica
Células NK
Funções de células NK
Funções de recetores de ativação e inibição em células NK
Mastócitos
Moléculas efetoras solúveis da imunidade inata
C1, “mannose binding lectin” e ficolina
Vias de ativação do sistema do complemento
Resposta inflamatória aguda
Técnicas imunológicas em investigação- Métodos para isolamento das células do sistema imune: isolamento e ensaios funcionais
18 Março 2024, 09:30 • Iris Caramalho
Imunologia de sistemas: visão holística da resposta imunológica
A importância da análise do sangue em estudos humanos
Isolamento de células mononucleares de sangue periférico de humanos por centrifugação num gradiente de Ficol
Isolamento de linfócitos de órgãos linfoides de ratinhos
Purificação de populações específicas de linfócitos por FACS ou por “magnetic-activated cell sorting” (MACS)
Métodos para estudar a resposta de linfócitos T in vitro
Estímulos policlonais- Concanavalina-A efitohemaglutinina (PHA), anticorpos anti-CD3 e anti-CD28, superantigénios, PMA+Ion
e Estímulos específicos: péptidos
Avaliação da proliferação celular: Incorporação de timidia tritiada, BrDU, iodeto de propídio
E CFSE
Avaliação da morte celular: Medição da atividade de caspase 3 e Tunel
Avaliação da produção de citocinas: Elisa e ELISPOT, marcação intracelular de citocinas e análise por citometria de fluxo
Estudo da especificidade de linfócitos T: tetrâmeros
Ensaio de citotoxicidade para avaliação da função de linfócitos T CD8+ citotóxicos
Esta aula foi lecionada pela Prof. Teresa Pais
TP2: Citometria de Fluxo e FACS
13 Março 2024, 09:00 • Federico Herrera Garcia
Após de uma apresentação de 5 minutos e a visualização de um video (https://youtu.be/Mitt61jn1TE) sobre os fundamentos da citometría de fluxo e FACS, os estudantes resolveram uma serie de problemas práticos em aula, utilizando gráficas típicas de citometría de fluxo. A estes problemas seguiram exercícios de escolha de fluorocromos com ferramentas online: https://www.thermofisher.com/pt/en/home/life-science/cell-analysis/labeling-chemistry/fluorescence-spectraviewer.html. Finalmente, os estudantes utilizaram um simulador de citometría de fluxo online para familiarizar-se com este tipo de análise: https://facs.sbg.ac.at/FACS_Simulator/
Os estudantes fizeram um relatório destes exercícios que entregaram e que foi parte da avaliação continua desta cadeira.