Sumários

Geração de diversidade BCR e TCR

28 Março 2022, 11:00 • Margarida Henriques da Gama Carvalho

As respostas humoral e celular dependem de receptores de antigénio. Os TCRs têm uma estrutura semelhante aos anticorpos. As imunoglobulinas apresentam várias estruturas possíveis. Os “genes” das imunoglobulinas: segmentos génicos da região constante e variáveis, rearranjo dos genes das cadeias leves e rearranjo dos genes das cadeias pesadas. Rearranjo dos receptores de antigénio. Mecanismos da recombinação V(D)J. Non-homologous end joining (NHEJ). Geração de diversidade: Adições P e Adições N, Flexibilidade Juncional. Hipermutação somática: evolução da afinidade durante o processo de ativação. Expressão da cadeia pesada μ ou δ (IgM vs IgD) e Class-switch recombination durante a ativação.

TP3: Citometria de Fluxo e FACS

22 Março 2022, 14:00 • Federico Herrera Garcia

Após de uma apresentação de 5 minutos e a visualização de um video (https://youtu.be/Mitt61jn1TE) sobre os fundamentos da citometría de fluxo e FACS, os estudantes resolveram uma serie de problemas práticos em aula, utilizando gráficas típicas de citometría de fluxo. A estes problemas seguiram exercícios de escolha de fluorocromos com ferramentas online: https://www.thermofisher.com/pt/en/home/life-science/cell-analysis/labeling-chemistry/fluorescence-spectraviewer.html. Finalmente, os estudantes utilizaram um simulador de citometría de fluxo online para familiarizar-se com este tipo de análise: https://facs.sbg.ac.at/FACS_Simulator/

Os estudantes fizeram um relatório destes exercícios que entregaram e que foi parte da avaliação continua desta cadeira.

1. Parte I: Procurar informação online e responder as seguintes preguntas

a. Diferença entre afinidade e avidez

b. Diferença entre imunoprecipitação e aglutinação

c. Diferença entre anticorpo primário e secundário

d. Diferença entre detecção direita e indireita. Vantagens principais da detecção indireita.

2. Parte II: Técnicas baseadas em anticorpos

Procurar informação online (pode utilizar informação de suporte dada pelos professores):

a. Radioimmunoassay (RIA)

b. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)

c. Immunocytochemistry/Immunohistochemistry

d. Agglutination

e. Immunoprecipitation

f. Western blotting

g. Passive versus active immunodiffusion

h. Flow Cytometry-assisted Cell Sorting (FACS)

Preparar um breve trabalho (Máximo 2 páginas) onde descreva os princípios e aplicações destas técnicas, com especial ênfase nas suas diferenças, limitações, vantagens,…

Imunologia

Sumários

Geração de diversidade BCR e TCR

TP3: Citometria de Fluxo e FACS

TP3: Citometria de Fluxo e FACS

TP3: Citometria de Fluxo e FACS

TP2: Métodos baseados em anticorpos