Plano de Estudos

Bioquímica Experimental I BE-I

Contextos

ECTS

6.0 (para cálculo da média)

Objectivos

Esta unidade curricular (UC) visa que os estudantes dominem várias técnicas bioquímicas básicas envolvidas na preparação de material biológico e na purificação e análise de biomoléculas. No final desta UC, os alunos deverão estar aptos a: (1) otimizar o fracionamento de uma amostra biológica por centrifugação diferencial; (2) interpretar cromatogramas de acordo com os princípios da técnica realizada; (3) interpretar géis obtidos por SDS-PAGE, sob condições redutoras e não redutoras; (4) preparar quadros de purificação de proteínas; (5) quantificar o estabelecimento de interações proteína-ligando por aplicação de métodos espetrofotométricos UV-Vis ; (6) realizar o doseamento de um analito por HPLC, e (7) visualizar a estrutura 3D de proteínas através da utilização do programa Pymol. Os alunos deverão ainda desenvolver competências de tratamento e análise crítica dos resultados obtidos com vista à interpretação dos mesmos e escrita científica de relatórios.

Programa

Nesta UC serão realizados vários trabalhos práticos/mini-projetos com duração temporal variável: T1 – Fracionamento subcelular por centrifugação diferencial (3 sessões). T2 – Separação de misturas por cromatografia de exclusão molecular (1 sessão). T3 – Introdução à visualização molecular de biomoléculas (2 sessões). T4 – Purificação do lisozima da clara do ovo por cromatografia de troca iónica. Preparação de um quadro de purificação e análise da separação realizada por SDS-PAGE (4 sessões). T5 – Doseamento de substâncias ativas num medicamento por HPLC (1 sessão). T6 – Quantificação de interações proteína-ligando por espetrofotometria de absorção UV-VIS (1 sessão).

Método de Avaliação

A avaliação tem uma componente contínua que será complementada com um exame final escrito de modo a avaliar o nível de competências adquiridas por cada estudante individualmente: (1) Avaliação contínua > 50% da nota final - avaliação do desempenho laboratorial de cada estudante (inclui apreciação da preparação prévia do trabalho no caderno de laboratório, pontualidade, organização, atitude e desempenho técnico do estudante); - avaliação dos pré-questionários e relatórios dos trabalhos práticos efetuados (a nota final será ponderada pela duração de cada trabalho prático). Quatro relatórios serão discutidos em grupo ao longo do semestre. A presença dos estudantes na discussão dos relatórios é obrigatória. Uma falta não justificada na discussão dos relatórios implica a classificação de zero no respetivo trabalho prático. (2) Exame final escrito individual > 50% da nota final. Para se obter aprovação na UC, a nota de cada componente de avaliação - (1) e (2) - dever ser maior ou igual a 9,5 numa escala de 0 -20.

Carga Horária

Bibliografia

Principal

• Quantitative Chemical Analysis (10ª ed.): Harris, D.C. & Lucy, C.A. 2020 ISBN: 9781319274016
• Practical Skills in Biomolecular Science (6ª ed.): Reed, R., Holmes, D.A., Weyers, J. & Jones A. 2022 ISBN 9781292397085
• Wilson and Walker's Principles and Techniques of Biochemistry and Molecular Biology (8ª ed): Hofmann, A. & Clokie, S. (Eds.) 2018 ISBN: 9781316614761

Secundária

Disciplinas de Execução

2026/2027 - 1 Semestre