Disciplina Curricular
Bioquímica Analítica BAnl
Licenciatura Bolonha em Bioquímica - 6_LBioq 2022/23
Contextos
Grupo: 6_LBioq 2022/23 > 1º Ciclo > Bioquímica - Tronco Comum
Período:
Peso
6.0 (para cálculo da média)
Objectivos
Providenciar uma introdução geral às técnicas bioquímicas analíticas e preparativas fundamentais (técnicas de centrifugação, cromatográficas, eletroforéticas e espetrofotometria de absorção UV-vis) envolvidas no fracionamento subcelular, purificação, caracterização e análise quantitativa de diversas classes de biomoléculas. No final desta UC, os estudantes devem: (i) conhecer os princípios, vantagens e limitações das principais técnicas laboratoriais bioquímicas; (ii) ser capazes de desenhar experiências bioquímicas simples de modo a gerar resultados científicos de elevada qualidade, e (iii) avaliar de um modo crítico protocolos experimentais descritos na literatura. Nota: esta UC é complementar a Bioquímica Experimental I, que decorre em paralelo no plano curricular da Licenciatura em Bioquímica, e onde vão ser realizadas laboratorialmente muitas das técnicas aqui discutidas.
Programa
I - Preparação de Amostras para Análise Química e Bioquímica Estudos bioquímicos: objetivos e estratégia geral. Métodos de desintegração de células e tecidos. II - Técnicas de Centrifugação Centrifugação diferencial, zonal de velocidade e isopícnica. Preparação e análise de gradientes. Tipos de centrífugas e rotores. III - Técnicas Cromatográficas Princípios básicos. Cromatografias de adsorção, partição, exclusão molecular, permuta iónica e de afinidade. Cromatografia líquida de elevada eficiência, HPLC. Análise qualitativa e quantitativa das separações cromatográficas. IV - Técnicas Eletroforéticas Princípios gerais. SDS-PAGE e PAGE em gradiente de poro. Focagem isoelétrica. Eletroforese bidimensional. V - Purificação de proteínas Esquema geral de uma purificação. Quadro de purificação. Proteínas recombinantes. Proteínas de fusão com tags de afinidade. VI - Espectrofotometria UV-vis Lei de Beer-Lambert: derivação e desvios. Aplicações qualitativas e quantitativas.
Métodos de ensino e avaliação
Para obter aprovação na UC, os alunos deverão frequentar pelo menos 2/3 das aulas teórico-práticas realizadas. Avaliação: Opção A - Realização de dois testes parciais - cada um dos testes contribui com 50% para a nota final - a média dos dois testes deve ser igual ou superior a 9,5 valores. ou Opção B - Exame final escrito individual (100%). - a nota do exame deve ser igual ou superior a 9,5 valores.