HPLC III

4 Novembro 2021, 17:00 • Ana Isabel Abrantes Coutinho

Cromatografia líquida de elevada eficiência, HPLC (III).

Propriedades ideais de um detetor. Detetores usados em HPLC: detetores seletivos e detetores de aplicação universal. Detetores UV-vis convencional e de rede de díodos. Fatores de resposta e detetores UV-vis. Derivatização química das amostras. Técnicas hifenadas – interface com outros métodos espectroscópicos.

Análise qualitativa e quantitativa em HPLC. Métodos do padrão externo, método do padrão interno e método da normalização interna.

HPLC II

3 Novembro 2021, 16:30 • Ana Isabel Abrantes Coutinho

Cromatografia líquida de elevada eficiência, HPLC (II).

Ilustração do problema geral de eluição. Eluição isocrática e em gradiente.

Separação de compostos iónicos por RP-HPLC através da anulação das cargas: supressão da ionização e formação de pares iónicos.

Componentes de um equipamento típico de HPLC. Propriedades dos solventes. Bombas para HPLC. Válvulas de injeção. Caraterísticas das colunas e utilização de pré-colunas.

HPLC I

28 Outubro 2021, 17:00 • Ana Isabel Abrantes Coutinho

Cromatografia líquida de elevada eficiência, HPLC (I).

Estratégia de otimização da eficiência da cromatografia líquida (minimização da altura equivalente a um prato teórico, H) e suas consequências (aumento da pressão requerida) > Cromatografia líquida de elevada eficiência, HPLC.  Utilização de fases ligadas em cromatografia de partição. Separações em fase normal e fase reversa. Critérios de seleção da fase estacionária e de otimização da separação.

Cromatografia de afinidade.

21 Outubro 2021, 17:00 • Ana Isabel Abrantes Coutinho

Princípios básicos de separação em cromatografia de afinidade: equilíbrio de ligação ligando-proteína. Etapas da realização de uma cromatografia de afinidade. Critérios a observar na seleção da matriz e do ligando. A importância dos braços espaçadores. Estratégias de eluição: método de eluição seletivo e não seletivo. Exemplo de aplicações.

Cromatografia de troca iónica (IEX).

20 Outubro 2021, 16:30 • Ana Isabel Abrantes Coutinho

Princípios básicos de separação em cromatografia de troca iónica: permuta catiónica e permuta aniónica. Força do permutador e capacidade do permutador. Critérios a observar na escolha do permutador, tampão de eluição, na preparação da amostra e nas estratégias de eluição. Etapas gerais de uma cromatografia de troca iónica. Apresentação de alguns exemplos.