Sumários
Série de Problemas VII
26 Novembro 2025, 17:30 • Ana Isabel Abrantes Coutinho
Resolução da série de problemas VII - Esquemas de purificação de proteínas I
Métodos de purificação de proteínas III
26 Novembro 2025, 16:30 • Ana Isabel Abrantes Coutinho
Proteínas de fusão. Tags de afinidade de uso mais comum. Tags de afinidade de elevada e de baixa massa molecular – vantagens e desvantagens. Remoção do tag de afinidade por proteólise enzimática.
Exemplos de purificação de proteínas de fusão:
Caso I – Purificação de proteínas de fusão com GST
Caso II – Purificação de proteínas de fusão com 6xHis/ cromatografia de iões metálicos imobilizados (IMAC)
Vantagens e desvantagens da purificação de proteínas de fusão.
Dérie de Problemas VI
21 Novembro 2025, 11:00 • Ana Isabel Abrantes Coutinho
Resolução da série de problemas VI - Cromatografias de exclusão molecular, troca iónica e de afinidade
Métodos de purificação de proteínas II
20 Novembro 2025, 14:00 • Ana Isabel Abrantes Coutinho
Princípios gerais de desenvolvimento de um esquema de purificação de proteínas tradicional (II).
Monitorização da purificação realizada: doseamento de proteína total e métodos de identificação específicos da proteína a purificar. Quadros de purificação. Avaliação do grau de pureza final.
Produção de proteínas recombinantes em E. coli. Metodologia geral. Vetores de expressão. Controlo da expressão pelo operão lac. Formação de corpos de inclusão: vantagens e desvantagens.
Problemas encontrados na expressão heteróloga de proteínas relacionados com o gene de interesse e com o organismo hospedeiro selecionado.
Série de problemas VI
19 Novembro 2025, 17:30 • Ana Isabel Abrantes Coutinho
Resolução da série de problemas VI - Cromatografias de exclusão molecular, troca iónica e de afinidade