Sumários

Série de problemas 8

7 Dezembro 2022, 17:30 Ana Isabel Abrantes Coutinho

Resolução de problemas da série de problemas 8


Métodos de purificação de proteínas III.

7 Dezembro 2022, 16:30 Ana Isabel Abrantes Coutinho

Proteínas de fusão. Tags de afinidade de uso mais comum. Tags de afinidade de elevada e de baixa massa molecular – vantagens e desvantagens. Remoção do tag de afinidade por proteólise enzimática.

Exemplos de purificação de proteínas de fusão:

Caso I – Purificação de proteínas de fusão com GST

Caso II – Purificação de proteínas de fusão com 6xHis/ cromatografia de iões metálicos imobilizados (IMAC)

Vantagens e desvantagens da purificação de proteínas de fusão.


Série de problemas 7

2 Dezembro 2022, 11:00 Ana Isabel Abrantes Coutinho

Resolução de problemas da série de problemas 7


Série de Problemas 7

30 Novembro 2022, 17:30 Ana Isabel Abrantes Coutinho

Resolução de problemas da série de problemas 7


Métodos de purificação de proteínas II.

30 Novembro 2022, 16:30 Ana Isabel Abrantes Coutinho

Princípios gerais de desenvolvimento de um esquema de purificação de proteínas tradicional (II).

Monitorização da purificação realizada: doseamento de proteína total e métodos de identificação específicos da proteína a purificar. Quadros de purificação. Avaliação do grau de pureza final.

Produção heteróloga de proteínas recombinantes. Metodologia geral de sobre-expressão de proteínas em bactérias. Vetor de expressão. Controlo da expressão pelo operão lac.

Formação de corpos de inclusão: vantagens e desvantagens.