Sumários
Série de problemas 8
7 Dezembro 2022, 17:30 • Ana Isabel Abrantes Coutinho
Resolução de problemas da série de problemas 8
Métodos de purificação de proteínas III.
7 Dezembro 2022, 16:30 • Ana Isabel Abrantes Coutinho
Proteínas de fusão. Tags de afinidade de uso mais comum. Tags de afinidade de elevada e de baixa massa molecular – vantagens e desvantagens. Remoção do tag de afinidade por proteólise enzimática.
Exemplos de purificação de proteínas de fusão:
Caso I – Purificação de proteínas de fusão com GST
Caso II – Purificação de proteínas de fusão com 6xHis/ cromatografia de iões metálicos imobilizados (IMAC)
Vantagens e desvantagens da purificação de proteínas de fusão.Série de problemas 7
2 Dezembro 2022, 11:00 • Ana Isabel Abrantes Coutinho
Resolução de problemas da série de problemas 7
Série de Problemas 7
30 Novembro 2022, 17:30 • Ana Isabel Abrantes Coutinho
Resolução de problemas da série de problemas 7
Métodos de purificação de proteínas II.
30 Novembro 2022, 16:30 • Ana Isabel Abrantes Coutinho
Princípios gerais de desenvolvimento de um esquema de purificação de proteínas tradicional (II).
Monitorização da purificação realizada: doseamento de proteína total e métodos de identificação específicos da proteína a purificar. Quadros de purificação. Avaliação do grau de pureza final.
Produção heteróloga de proteínas recombinantes. Metodologia geral de sobre-expressão de proteínas em bactérias. Vetor de expressão. Controlo da expressão pelo operão lac.
Formação de corpos de inclusão: vantagens e desvantagens.