Sumários

Transformação de B. subtilis (continuação). Conjugação de plasmídeos em E.coli

23 Outubro 2019, 17:00 Margarida Maria Cabral Lages Azevedo Santana

Extração de DNA total de B. subtilis.

 Revisao do protocol de conjugação em E.coli. Preparacao de meios selectivos;  Medicao da taxa de crescimento celular  da

cultura mista de conjugacâo; Inoculacao nos meios selectivos da cultura mista de conjugacão.


Análise bioquímica de mutantes ara | Transformação de Bacillus subtilis | Conjugação de plasmídeos conjugativos em Escherichia coli

23 Outubro 2019, 14:00 Mónica Vieira Cunha

Análise bioquímica de mutantes para a arabinose em Bacillus subtilis: 

6 . Registo de resultados


Transformação de Bacillus subtilis:
3 . Extração de DNA total de B. subtilis (BD168)


Conjugação de plasmídeos conjugativos em Escherichia coli
1 . Breve revisão do protocolo
2 . Preparação das caixas de Petri com os meios selectivos
3 . Medição da taxa de crescimento celular através da leitura de densidades óticas da cultura mista de conjugação

4 . Inoculação, nos meios selectivos (preparados em 1.), da cultura mista de conjugação 


Sistemas de transdução de sinal mediados por fosforilação

22 Outubro 2019, 13:30 Mónica Vieira Cunha

Fosforilação e desfosforilação de proteínas. Controlo global da transcrição através de sistemas de transdução de sinal. Sistemas de dois componentes. Mecanismos moleculares subjacentes à regulação da assimilação de azoto em Escherichia coli. 

Niveis de regulação e cascatas de sinalização envolvidas no controlo transcricional dos processos moleculares subjacentes à assimilação de azoto em Escherichia coli; regulação exercida pela proteína enhancer NtrC~P na abertura do complexo de transcrição formado pela holoenzima e sigma 54; regulação pós transcricional exercida pelos produtos dos genes glnB e glnD em NtrB. Regulação pós-traducional da atividade de glutamina sintetase mediada pelo produto do gene glnE.



Continuação da aula anterior e Transformação de B. subtilis

17 Outubro 2019, 16:30 Sílvia Carneiro Alves

I. Análise bioquímica das estirpes para a arabinose em B. subtilis

3. Inoculação das estirpes , por riscado
4. Detecção da cetopentose

II. Transformação de B. subtilis
1. Revisão do protocolo
2. Preparação de células competentes


Continuação da aula anterior e Transformação de B. subtilis

17 Outubro 2019, 13:30 Sílvia Carneiro Alves

I. Análise bioquímica das estirpes para a arabinose em B. subtilis

3. Inoculação das estirpes , por riscado
4. Detecção da cetopentose

II. Transformação de B. subtilis
1. Revisão do protocolo
2. Preparação de células competentes