Sumários

GP_03_Regulação genética e regulação metabólica

4 Outubro 2022, 13:30 • Mónica Vieira Cunha

Regulação metabólica e redes de regulação.

Regulação positiva da transcrição. O exemplo paradigmático do regulão da arabinose em Escherichia coli: genes estruturais e estrutura operónica; localização no cromossoma; promotores, operadores, regulador e indutor do operão da arabinose. Transportadores de alta e baixa afinidade para a arabinose. Regulação da transcrição do operão ara por mecanismos de ativação e de anti-ativação Os estados P1 e P2 da proteína AraC. Autoregulação da transcrição de araC. Evidências experimentais que sugeriram a existência da formação de uma ansa de DNA e de cooperação na regulação.  

Contraste com o mecanismo de regulação da transcrição do operão catabólico da arabinose em B. subtilis: genes estruturais e estrutura operónica; localização no cromossoma; promotores, operadores, tipo de regulação, repressor e indutor.  Transportadores de alta e baixa afinidade para a arabinose. Regulação da transcrição do operão ara por repressão. A proteína AraR. Regulação cooperativa e não cooperativa. 

Regulação do operão da galactose em E. coli: genes estruturais e estrutura operónica; localização no cromossoma; promotores, operadores, reguladores e indutores. A proteína GalR. Regulação cooperativa e não cooperativa. 

Expressão descoordenada do operão gal em E. coli. Regulação pós-transcricional do operão da galactose exercida pelo RNA antisense spot42 e pela proteína Hfq. Importãncia fisiológica da regulação por spot42. 

Mecanismos moleculares de regulação pós-transcricional exercida por pequenos RNA não codificantes (sRNA). Ação exercida pela chaperona Hfq. 

Exemplos da ação exercida por RNA antisense no controlo restritivo da expressão génica em diferentes microrganismos e diferentes condições de stress ambiental.  

 

 

Semana 02 | 26 a 30 de Setembro de 2022

29 Setembro 2022, 16:30 • Sílvia Carneiro Alves

P1 | Análise bioquímica de mutantes ara- de Bacillus subtilis 


A. Preparação dos meios de cultura necessários à análise dos mutantes ara-

B. Deteção de ribulose


P2 | Análise da eficiência de transformação de Bacillus subtilis

A. Preparação de células competentes de Bacillus subtilis (BR151)

B. Extração de DNA total de Bacillus subtilis (BD168)

P2

29 Setembro 2022, 13:30 • Artur Bastos Lourenço

Análise bioquímica de mutantes ara- em Bacillus subtilis. Preparação e inoculação dos meios de cultura necessários à análise dos mutantes ara-. Deteção de ribulose.
Análise da eficiência de transformação de Bacillus subtilis. Preparação de células competentes de Bacillus subtilis (BR151). Extração de DNA total de Bacillus subtilis (BD 168).

P2

28 Setembro 2022, 17:00 • Artur Bastos Lourenço

Análise bioquímica de mutantes ara- em Bacillus subtilis. Preparação e inoculação dos meios de cultura necessários à análise dos mutantes ara-. Deteção de ribulose.
Análise da eficiência de transformação de Bacillus subtilis. Preparação de células competentes de Bacillus subtilis (BR151). Extração de DNA total de Bacillus subtilis (BD 168).

Análise bioquímica de mutantes ara em B. subtilis ( continuação). Transformação de B. subtilis.

28 Setembro 2022, 14:00 • Margarida Maria Cabral Lages Azevedo Santana

Preparação de meios seletivos e estria de mutantes ara de B. subtilis.

Transformação de B. subtilis: preparação de células competentes e extracção de DNA cromossómico.