Sumários
Técnicas imunológicas em investigação IV: Isolamento de populações linfoides e ensaios funcionais
20 Março 2023, 12:00 • Iris Caramalho
Métodos para obter populações de linfócitos para estudos funcionais:
Isolamento de células mononucleares de sangue periférico de humanos por centrifugação num gradiente de Ficol
Isolamento de linfócitos de órgãos linfoides de ratinhos
Purificação de populações específicas de linfócitos por FACS ou por “magnetic-activated cell sorting” (MACS)
Métodos para estudar a resposta de linfócitos T in vitro:
Estímulos policlonais- Concanavalina-A, fitohemaglutinina (PHA), anticorpos anti-CD3 e anti-CD28, superantigénios, PMA+Ionomicina; e Estímulos específicos: péptidos
Avaliação da proliferação celular: Incorporação de timidia tritiada, BrDU, iodeto de propídio e CFSE
Avaliação da morte celular: Medição da atividade de caspase 3, anexina e Tunel
Avaliação da produção de citocinas: Elisa e ELISPOT, marcação intracelular de citocinas e análise por citometria de fluxo
Estudo da especificidade de linfócitos T: tetrâmeros
Ensaio de citotoxicidade para avaliação da função de linfócitos T CD8+ citotóxicos
Esta aula foi lecionada pela Prof. Teresa Pais
MHC: genética, função e associação a doenças
20 Março 2023, 11:00 • Iris Caramalho
Nomenclatura e
importância do MHC
Conceito de histocompatibilidade
Organização genética do locus do MHC
Diversidade do MHC: poligénico, polimórfico, expresso em co-dominância
Propriedades das moléculas e genes do MHC
Importância do polimorfismo do MHC
Associação de determinados alelos de MHC com doenças autoimunes
Importância da diversidade do MHC na proteção contra infeções
Imunidade inata (cont.)
14 Março 2023, 12:00 • Iris Caramalho
Resposta inflamatória: Recrutamento de fagócitos para locais de infeção; Sequência de eventos na migração de leucócitos do sangue para os locais de infeção
Ações locais e sistémicas de citocinas na inflamação
Citocinas da imunidade inata
Respostas antivirais
Funções mediadas por IFN-I
Ação biológica de membros da família IFN-I
IFN-I na resposta protetora contra infeções virais
Estimulação da imunidade adquirida pela resposta imunológica inata
Citocinas produzidas por células da imunidade inata e seus papel na diferenciação de linfócitos T CD4+ naive
Controlo da duração e extensão da resposta inflamatória
Mecanismos de controlo da extensão da resposta imunológica inata
Modulação da resposta inflamatória
Técnicas imunológicas em investigação III
13 Março 2023, 12:00 • Federico Herrera Garcia
Após de uma
apresentação de 5 minutos e a visualização de um video (https://youtu.be/Mitt61jn1TE) sobre os
fundamentos da citometria de fluxo e FACS, os estudantes resolveram uma série
de problemas práticos na aula, utilizando resultados típicos de citometria de
fluxo. A estes problemas seguiram-se exercícios de escolha de fluorocromos com
ferramentas online: https://www.thermofisher.com/pt/en/home/life-science/cell-analysis/labeling-chemistry/fluorescence-spectraviewer.html.
Finalmente, os estudantes utilizaram um simulador de citometria de fluxo online
para se familiarizarem com este tipo de análise: https://facs.sbg.ac.at/FACS_Simulator/
Os estudantes fizeram um relatório destes exercícios que entregaram e que foi parte da avaliação continua desta cadeira.
Técnicas imunológicas em investigação III
13 Março 2023, 12:00 • Iris Caramalho
Após de uma
apresentação de 5 minutos e a visualização de um video (https://youtu.be/Mitt61jn1TE) sobre os
fundamentos da citometria de fluxo e FACS, os estudantes resolveram uma série
de problemas práticos na aula, utilizando resultados típicos de citometria de
fluxo. A estes problemas seguiram-se exercícios de escolha de fluorocromos com
ferramentas online: https://www.thermofisher.com/pt/en/home/life-science/cell-analysis/labeling-chemistry/fluorescence-spectraviewer.html.
Finalmente, os estudantes utilizaram um simulador de citometria de fluxo online
para se familiarizarem com este tipo de análise: https://facs.sbg.ac.at/FACS_Simulator/
Os estudantes fizeram um relatório destes exercícios que entregaram e que foi parte da avaliação continua desta cadeira.