MHC: genética, função e associação a doenças

20 Março 2023, 11:00 • Iris Caramalho

Nomenclatura e importância do MHC

Conceito de histocompatibilidade

Organização genética do locus do MHC

Diversidade do MHC: poligénico, polimórfico, expresso em co-dominância

Propriedades das moléculas e genes do MHC

Importância do polimorfismo do MHC

Associação de determinados alelos de MHC com doenças autoimunes

Importância da diversidade do MHC na proteção contra infeções

Técnicas imunológicas em investigação IV: Isolamento de populações linfoides e ensaios funcionais

20 Março 2023, 09:00 • Teresa Pais

Métodos para obter populações de linfócitos para estudos funcionais:

Isolamento de células mononucleares de sangue periférico de humanos por centrifugação num gradiente de Ficol

Isolamento de linfócitos de órgãos linfoides de ratinhos

Purificação de populações específicas de linfócitos por FACS ou por “magnetic-activated cell sorting” (MACS)

Métodos para estudar a resposta de linfócitos T in vitro

Estímulos policlonais- Concanavalina-A e fitohemaglutinina (PHA), anticorpos anti-CD3 e anti-CD28, superantigénios, PMA+Ionomicina; e estímulos específicos: péptidos

Avaliação da proliferação celular: Incorporação de timidia tritiada, BrDU, iodeto de propídio e CFSE

Avaliação da morte celular: Medição da atividade de caspase 3 e Tunel

Avaliação da produção de citocinas: Elisa e ELISPOT, marcação intracelular de citocinas e análise por citometria de fluxo

Estudo da especificidade de linfócitos T: tetrâmeros

Ensaio de citotoxicidade para avaliação da função de linfócitos T CD8+ citotóxicos

TP3: Citometria de Fluxo e FACS

14 Março 2023, 14:00 • Iris Caramalho

Após de uma apresentação de 5 minutos e a visualização de um video (https://youtu.be/Mitt61jn1TE) sobre os fundamentos da citometría de fluxo e FACS, os estudantes resolveram uma serie de problemas práticos em aula, utilizando gráficas típicas de citometría de fluxo. A estes problemas seguiram exercícios de escolha de fluorocromos com ferramentas online: https://www.thermofisher.com/pt/en/home/life-science/cell-analysis/labeling-chemistry/fluorescence-spectraviewer.html. Finalmente, os estudantes utilizaram um simulador de citometría de fluxo online para familiarizar-se com este tipo de análise:  https://facs.sbg.ac.at/FACS_Simulator/

Esta aula foi lecionada pelo Prof. Federico Herrera.

Os estudantes fizeram um relatório destes exercícios que entregaram e que foi parte da avaliação continua desta cadeira.

Imunidade inata (cont.)

14 Março 2023, 12:00 • Iris Caramalho

Resposta inflamatória: Recrutamento de fagócitos para locais de infeção; Sequência de eventos na migração de leucócitos do sangue para os locais de infeção;

Ações locais e sistémicas de citocinas na inflamação;

Citocinas da imunidade inata;

Respostas antivirais;

Funções mediadas por IFN-I;

Ação biológica de membros da família IFN-I;

IFN-I na resposta protetora contra infeções virais; 

Estimulação da imunidade adquirida pela resposta imunológica inata

Citocinas produzidas por células da imunidade inata e seu papel na diferenciação de linfócitos T CD4+ naive

Controlo da duração e extensão da resposta inflamatória

Mecanismos de controlo da extensão da resposta imunológica inata

Modulação da resposta inflamatória

Imunidade Inata (cont.)

13 Março 2023, 11:00 • Iris Caramalho

Células dendríticas

Células linfoides inatas (ILCs)

Subtipos de ILCs e sua função na resposta imunológica

Células NK

Funções de células NK

Funções de recetores de ativação e inibição em células NK

Mastócitos

Moléculas efetoras solúveis da imunidade inata

C1, “mannose binding lectin” e ficolina

Vias de ativação do sistema do complemento

Resposta inflamatória