Continuação do PCR em tempo real

21 Setembro 2022, 09:00 • Rita Zilhão

Continuação do PCR em tempo real: A escolha dos controlos positivos e negativos. A escolha do controlo endógeno. Ensaios de validação, cálculo da eficiência e curvas padrão. Interpretação dos resultados de qPCR e quantificação. Planeamento de um ensaio de PCR. Métodos de quantificação – quantificação absoluta (método da curva padrão), quantificação relativa (método da curva padrão, delta delta Ct e Pfaffl). PCR qualitativo – discriminação alélica, a importância da curva de fusão (melting curve). Aplicações do qPCR.

Continuação do PCR em tempo real

21 Setembro 2022, 08:00 • Rita Zilhão

Continuação do PCR em tempo real: A escolha dos controlos positivos e negativos. A escolha do controlo endógeno. Ensaios de validação, cálculo da eficiência e curvas padrão. Interpretação dos resultados de qPCR e quantificação. Planeamento de um ensaio de PCR. Métodos de quantificação – quantificação absoluta (método da curva padrão), quantificação relativa (método da curva padrão, delta delta Ct e Pfaffl). PCR qualitativo – discriminação alélica, a importância da curva de fusão (melting curve). Aplicações do qPCR.

Apresentação e explicação da organização da disciplina. PCR em tempo real.

19 Setembro 2022, 09:00 • Rita Zilhão

Apresentação e explicação da organização da disciplina.

PCR em tempo real. Princípios do PCR em tempo real. O parâmetro de medição da fluorescência: Ct (threshold cycle).  Sistemas de deteção – compostos de ligação ao DNA não específicos, sondas específicas de sequências. O fenómeno de FRET. Sondas de hidrólise (ex. Taqman), sondas estruturadas (ex. Molecular Beacon), sondas de hibridação (ex. Light Cycler). Vantagens e desvantagens dos diferentes sistemas de deteção.

. Princípios do PCR em tempo real. O parâmetro de medição da fluorescência: Ct

19 Setembro 2022, 08:00 • Rita Zilhão

Apresentação e explicação da organização da disciplina.

PCR em tempo real. Princípios do PCR em tempo real. O parâmetro de medição da fluorescência: Ct (threshold cycle).  Sistemas de deteção – compostos de ligação ao DNA não específicos, sondas específicas de sequências. O fenómeno de FRET. Sondas de hidrólise (ex. Taqman), sondas estruturadas (ex. Molecular Beacon), sondas de hibridação (ex. Light Cycler). Vantagens e desvantagens dos diferentes sistemas de deteção.