Sumários
Técnicas de obtenção de organismos transgénicos.
9 Outubro 2024, 08:00 • Rita Zilhão
Técnicas de obtenção de organismos transgénicos. O que é um organismo transgénico, objectivos da sua construção e suas aplicações. Como se geram animais transgénicos – a escolha do transgene, as estratégias da construção molecular e a expressão do transgene. As células alvo na construção de um transgénico. Métodos de transferência génica. Como estabelecer e as estratégias das construções moleculares. A inserção aleatória, os efeitos de posição e gene targeting. Os cruzamentos necessários para a obtenção do transgene. A noção de organismo founder. Confirmação da obtenção de um transgene. Estratégias de seleção de inserção em locais específicos. Sistemas de expressão induzíveis (Tet ON/Tet OFF).
PCR em tempo real
7 Outubro 2024, 09:00 • Rita Zilhão
Exercício de quantificação relativa.
O PCR em tempo real no laboratório. Análise de resultados e resolução qPCR e exercícios. Visita ao lab.
PCR em tempo real: exercício de quantificação relativa.
7 Outubro 2024, 08:00 • Rita Zilhão
Exercício de quantificação relativa.
O PCR em tempo real no laboratório. Análise de resultados e resolução qPCR e exercícios. Visita ao lab.
PCR em tempo real, exercícios
4 Outubro 2024, 09:00 • Rita Zilhão
Continuação do PCR em tempo real: A escolha dos controlos positivos e negativos. A escolha do controlo endógeno. Ensaios de validação, cálculo da eficiência e curvas padrão. Interpretação dos resultados de qPCR e quantificação relativa e absoluta. Planeamento de um ensaio de PCR. Exercício de quantificação absoluta.
PCR em tempo real.
4 Outubro 2024, 08:00 • Rita Zilhão
PCR em tempo real. Princípios do PCR em tempo real. O parâmetro de medição da fluorescência: Ct (threshold cycle). Sistemas de deteção – compostos de ligação ao DNA não específicos, sondas específicas de sequências. O fenómeno de FRET. Sondas de hidrólise (ex. Taqman), sondas de hibridação (ex. Light Cycler). Vantagens e desvantagens dos diferentes sistemas de deteção.
Esta aula teve lugar a 2 de Outubro