Tecnologias utilizadas no estudo do RNA: um exemplo experimental: análise da função do gene CsiA de Bacillus clostridium.

18 Setembro 2024, 08:00 • Rita Zilhão

Tecnologias utilizadas no estudo do RNA: O que é o RNA e porque é importante estudar o RNA? Ex. RNA-based therapies, RNA-based vacines. Os diferentes tipos de RNA. Como trabalhar o RNA: cuidados, extração e purificação, síntese/transcrição in vitro. Metodologias e abordagens experimentais para responder a questões biológicas específicas que envolvam moléculas de RNA: localização in vivo (Fluorescence in situ hybridization (FISH), RNA-tagging system fused to fluorescent proteins (MS2-tagged RNA; life cells) ); análise de expressão génica (Northern blot, RT-PCR, Microarrays, RNA sequencing); interação RNA-RNA e RNA-proteínas (electrophoretic mobility shift assay (EMSA), super electrophoretic mobility assay, imunoprecipitação de RNA (RIP and CLIP) e o MS2-TRAP (MS2-tagged RNA affinity purification). Um exemplo experimental: análise da função do gene CsiA de Bacillus clostridium.

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Imunocitoquímica, imunohostoquímica.

16 Setembro 2024, 09:00 • Rita Zilhão

Reacção antigénio anticorpo. O tipo de amostras. Preparação das amostras: adesão, fixação, permeabilização, seccionamento, recuperação antigénios. Tipos de anticorpos. A escolha e a marcação dos anticorpos primários e secundários. Sistemas de marcação e deteção e amplificação de sinal. Processos de bloqueio. Montagem das amostras. Counterstaining. Análise por diferentes tipos de microscopia. Controlos positivos e negativos. Artefactos, problemas e soluções (ex. atividade cruzada de anticorpos e a utilização de anticorpos pré-adsorvidos), conselhos. Exemplos, aplicações e exercícios.

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Imunocitoquimica e imunohistoquimica

16 Setembro 2024, 08:00 • Rita Carlos

Definições

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