Sumários
Técnicas de obtenção de organismos transgénicos
30 Setembro 2020, 09:00 • Rita Zilhão
Técnicas de obtenção de organismos transgénicos. O que é um organismo transgénico, objectivos da sua construção e suas aplicações. Como se geram animais transgénicos – a escolha do transgene, as estratégias da construção molecular e a expressão do transgene. A inserção aleatória, os efeitos de posição e gene targeting. Estratégias de seleção de inserção em locais específicos. Sistemas de expressão induzíveis (Tet ON/Tet OFF) e condicionais (os sistemas Cre/loxP e FLP/FRT). Modificação dirigida de genomas através de nucleases específicas: ZFNs e TALENs. As células alvo na construção de um transgénico. Métodos de transferência génica. Organismos founder e os cruzamentos necessários para a obtenção do transgene. Confirmação da obtenção de um transgene. Transgénicos em diferentes modelos animais (ratinho, galinha, zebrafish). Preocupações éticas.
TP Citometria de fluxo. Definição e fundamentos da citometria de fluxo
28 Setembro 2020, 10:00 • Rita Zilhão
Aula em formato zoom. Citometria de fluxo. Definição e fundamentos da citometria de fluxo: o que é a citometria de fluxo e como medi-la. Para que serve, vantagens e os diferentes citómetros. Descrição dos componentes do citómetro de fluxo: fluídica (ponto de interrogação, focagem hidrodinâmica, pressão diferencial (“ flow rate”); óptica (sistema de lasers, emissão de luz - “ foward scatter” (FSC) e “ side scatter” (SSC) -, emissão de fluorescência – conjugar os diferentes fluorocromos, fluorescence spectra viwers, filtros; a eletrónica – detetores e processamento de sinal, como se mede, a importância da discriminação de dupletos; a digitilização e a apresentação dos resultados (histogramas, contour and density plots). Como preparar uma experiência de citometria de fluxo: a pergunta biológica, conhecer o citómetro que se usa, selecionar os reagentes (princípios e regras na escolha dos fluorocromos, a densidade antigénica, os anticorpos marcados em tandem, e preparar a amostra, controlos (biológicos, de qualidade, de coloração, de “ gating”), optimização, configurar o instrumento (controlos de compensação e FMO) e a aquisição da amostra, a análise (representação dos resultados e “gating”) e estatística dos resultados ( Mean e “ Median fluorescence intensity” (MFI), softwares de tratamento de dados) a publicação dos resultados (Myflowcyt). Fontes úteis de consulta e estudo.
Citometria de fluxo
28 Setembro 2020, 09:00 • Rita Zilhão
Aula em formato zoom. Citometria de fluxo. Definição e fundamentos da citometria de fluxo: o que é a citometria de fluxo e como medi-la. Para que serve, vantagens e os diferentes citómetros. Descrição dos componentes do citómetro de fluxo: fluídica (ponto de interrogação, focagem hidrodinâmica, pressão diferencial (“ flow rate”); óptica (sistema de lasers, emissão de luz - “ foward scatter” (FSC) e “ side scatter” (SSC) -, emissão de fluorescência – conjugar os diferentes fluorocromos, fluorescence spectra viwers, filtros; a eletrónica – detetores e processamento de sinal, como se mede, a importância da discriminação de dupletos; a digitilização e a apresentação dos resultados (histogramas, contour and density plots). Como preparar uma experiência de citometria de fluxo: a pergunta biológica, conhecer o citómetro que se usa, selecionar os reagentes (princípios e regras na escolha dos fluorocromos, a densidade antigénica, os anticorpos marcados em tandem, e preparar a amostra, controlos (biológicos, de qualidade, de coloração, de “ gating”), optimização, configurar o instrumento (controlos de compensação e FMO) e a aquisição da amostra, a análise (representação dos resultados e “gating”) e estatística dos resultados ( Mean e “ Median fluorescence intensity” (MFI), softwares de tratamento de dados) a publicação dos resultados (Myflowcyt). Fontes úteis de consulta e estudo.
Cont. de como escrever um artigo científico
25 Setembro 2020, 09:00 • Rita Zilhão
Aula em zoom e presencial. Cont. de como escrever um artigo científico: exposição dos objectivos e resultados de um projecto de investigação ( A P. berghei-based vaccine against P. vivax) com vista à escrita de um artigo por parte dos alunos.
Cont. de como escrever um artigo científico
25 Setembro 2020, 08:00 • Rita Zilhão
Aula em zoom e presencial. Cont. de como escrever um artigo científico: exposição dos objectivos e resultados de um projecto de investigação ( A P. berghei-based vaccine against P. vivax) com vista à escrita de um artigo por parte dos alunos.