Ácidos nucleicos virais como ferramentas de variabilidade e de expressão génica (continuação)

11 Dezembro 2018, 14:30 • Maria Filomena Ribeiro Alcobia da Silva Trabucho Caeiro

Determinação do período p.i. em que se expressam os genes virais MCP, Vif, polimerase de DNA, X (codifica para uma proteína putativa):

Deteção de mRNAS específicos (RT-PCR) nas amostras de RNA extraído de células testemunho e de células infetadas, em diferentes tempos p.i.. Visualização dos resultados obtidos por eletroforese. Regiões alvo: MCP, polimerase de DNA viral, proteína putativa X, fator de virulência Vif.

 

Restrição enzimática dos DNAs de partículas virais:

Digestão dos DNAs extraídos de partículas virais dos seis ranavírus em estudo, com as enzimas de restrição Hind III, Pst I, Msp I e Hpa II, tendo como objetivos 1) a sua diferenciação e 2) verificar o elevado nível de metilação do DNA viral, utilizando DNA de células Vero como testemunho positivo das digestões.