Sumários
Série de Problemas VIII
4 Dezembro 2024, 17:30 • Ana Isabel Abrantes Coutinho
Resolução da série de problemas VIII
Métodos de Purificação de Proteínas III
4 Dezembro 2024, 16:30 • Ana Isabel Abrantes Coutinho
• Proteínas de fusão. Tags de afinidade de uso mais comum.
• Tags de afinidade de elevada e de baixa massa molecular – vantagens e desvantagens.
• Remoção do tag de afinidade por proteólise enzimática.
• Exemplos de purificação de proteínas de fusão:
• Caso I – Purificação de proteínas de fusão com GST
• Caso II – Purificação de proteínas de fusão com 6xHis/ cromatografia de iões metálicos imobilizados (IMAC)
Série de problemas VII
29 Novembro 2024, 11:00 • Ana Isabel Abrantes Coutinho
Resolução da série de problemas VII
Métodos de purificação de proteínas II
28 Novembro 2024, 14:00 • Ana Isabel Abrantes Coutinho
Princípios gerais de desenvolvimento de um esquema de purificação de proteínas tradicional (II):
• Monitorização da purificação realizada: doseamento de proteína total e métodos de identificação específicos da proteína a purificar. Quadros de purificação. Avaliação do grau de pureza final.
Produção de proteínas recombinantes em E. coli.
• Metodologia geral. Vetores de expressão. Controlo da expressão pelo operão lac.
• Formação de corpos de inclusão: vantagens e desvantagens.
Problemas encontrados na expressão heteróloga de proteínas relacionados com o gene de interesse e com o organismo hospedeiro selecionado.Série de Problemas VII
27 Novembro 2024, 17:30 • Ana Isabel Abrantes Coutinho
Resolução da série de problemas VII