As células estaminais

23 Abril 2018, 15:00 • Solveig Thorsteinsdottir

Desenvolvimento de assimetria esquerda-direita

19 Abril 2018, 17:30 • Solveig Thorsteinsdottir

Aula dada pelos ex-alunos Mestre Dalila Silva e Mestre José Leitão a convite da docente da disciplina:

O desenvolvimento de assimetria esquerda-direita, focando priniciplamente no modelo peixe zebra. O primeiro órgão a tornar-se assimétrico durante o desenvolvimento é o coração.

Quais as evidências genéticas de assimetría esquerda-direita? Expressão assimétrica de e.g. Nodal, Pitx2, Snail, Caronte na mesoderme lateral. Sobreexpressão do Nodal do lado direito causa randomização no torcimento do coração. A assimetría esquerda direita surge muito cedo. Estádio HH5 na galinha há expressão assimétrica de Nodal, Shh, Fgf8, Delta a volta do nó de Hensen. Também há sinalização assimétrica de Ca++. Assim, a assimetria esquerda-direta estabelece-se em fases: 1. A volta do nó; 2. Na mesoderme lateral; 3. Assimetria morfológica dos orgãos internos.

A descoberta dos monocílios do nó no embrião de ratinho. Experiêncas do Takeda et al 1999. A hipotese do fluxo nodal. A secreção contendo morfogénios como o Shh e a libertação do Ca++ como indutores de assimetria. Os movimentos das células a volta do nó como outro possível mecanismo de assimetria (Cui et al., 2009; Gros et al., 2009).

Desenvolvimento dos restantes órgãos internos derivados da endoderme e mesoderme esplâncnica. 

Hibridação in situ em embriões de galinha - revelação da hibridação in situ

17 Abril 2018, 13:00 • Solveig Thorsteinsdottir

Revelação das hibridações in situ da aula anterior segundo o seguinte protocolo:

Dia 4 da hibridação in situ

1.  Lavar 2 vezes 10 min em NTMT no “roller” a temperatura ambiente

Revelação (incubação com um substrato da fosfatase alcalina – o “BM Purple”):

2.  Colocar em BM Purple e incubar a temperatura ambiente no escuro até se ver claramente uma coloração roxa.
3.  Quando tiver suficientemente revelado (o tempo de revelação depende da sonda...), retirar o BM Purple e lavar 3 vezes em PBT
4.  Guardar em PBT com azida.

Hibridação in situ em embriões de galinha - revelação da hibridação in situ

17 Abril 2018, 08:00 • Solveig Thorsteinsdottir

Revelação das hibridações in situ da aula anterior segundo o seguinte protocolo:

Dia 4 da hibridação in situ

1.  Lavar 2 vezes 10 min em NTMT no “roller” a temperatura ambiente

Revelação (incubação com um substrato da fosfatase alcalina – o “BM Purple”):

2.  Colocar em BM Purple e incubar a temperatura ambiente no escuro até se ver claramente uma coloração roxa.
3.  Quando tiver suficientemente revelado (o tempo de revelação depende da sonda...), retirar o BM Purple e lavar 3 vezes em PBT
4.  Guardar em PBT com azida.

Gastrulação nos mamíferos

16 Abril 2018, 15:00 • Solveig Thorsteinsdottir

Gastrulação e a formação do eixo antero-posterior e polarização dorso-ventral em embriões de mamíferos Diferênças entre o modelo anfíbio e a ave/mamífero no que respeita a indução neural. O papel do hipoblasto primário e secundário na indução neural vs indução da gastrulação e o papel da “anterior visceral endoderm” nos embriões de mamíferos. As novas teorias da origem embrionária da “anterior visceral endoderm” (derivado do nó).