Tutorial Analise de Imagens ImageJ BEIV
25 Fevereiro 2020, 15:31 • Federico Herrera Garcia
Boa tarde, alunos- Já estão disponíveis no Moodle o protocolo para o
analise de imagens da disciplina BEIV, junto com 3 imagens para vocês
poderem praticar se quiserem. As imagens são originais, obtidas no nosso
laboratório de precursores neurais de ratinho diferenciados a
astroglia. Têm dois canais: o verde (citoesqueleto, canal 1) e o azul
(nucleos, canal 2). Trata-se de utilizar o canal azul (Hoechst, nucleos)
para definir a área onde queremos medir a fluorescência nos otros
canais (NFkB, STAT3). Feito ao longo do tempo, podremos ter uma medida
quantitativa da migração do fator de transcripção NFkB ao núcleo das
células HeLa apois do estímulo com TNFalpha. Isto é algo difícil de
fazer por outros métodos, e da informação relevante sobre a dinámica
celular em células íntegras (ainda que mortas e fixadas neste caso). Com
células vivas é igualmente possível, ainda que os métodos são
diferentes. Não conseguimos utilizar anticorpos, porque são demasiado
grandes para atravessar a membrana celular, e então utilizamos
estratégias genéticas (transfeção com plasmidios e proteinas
fluorescentes, por exemplo).
Cumprimentos,