Série de problemas I

1 Outubro 2019, 10:30 • Ana Isabel Abrantes Coutinho

Resolução da 1ª série de problemas.

Sondas e fluoróforos usados em Bioquímica.

1 Outubro 2019, 09:30 • Ana Isabel Abrantes Coutinho

Introdução às principais sondas e fluoróforos usados em Bioquímica.

Fluoróforos intrínsecos e extrínsecos. Conjugação química de proteínas: estratégias gerais de derivatização química de resíduos de Cys e de grupos amina. Cuidados gerais a observar. 

Fluoróforos codificados geneticamente: proteínas fluorescentes no visível (GFP e mutantes).

A importância da autofluorescência de células e tecidos nos estudos in vivo.

Alguns exemplos de aplicações em estudos bioquímicos.

Instrumentação

24 Setembro 2019, 12:00 • Ana Isabel Abrantes Coutinho

Instrumentação básica em fluorescência (medidas em estado estacionário): componentes de um espectrofluorímetro convencional e leitor de microplacas.

Realização de medidas de fluorescência em estado estacionário: leis de dependência da intensidade de fluorescência com a concentração do fluoróforo.

Comparação da sensibilidade analítica da espectrofotmetria UV-Vis versus fluorometria.

Espectros de excitação e de emissão de fluorescência: medição experimental e correcção.

Artefactos experimentais e erros comuns em medidas de fluorescência em estado estacionário.

Introdução à Espectrocopia de Fluorescência

24 Setembro 2019, 09:30 • Ana Isabel Abrantes Coutinho

Apresentação do módulo I: Introdução à espectroscopia de fluorescência..

Interacções radiação – matéria. Espectroscopia de absorção: Lei de Beer-Lambert.

Diagrama de Perrin-Jablonski. Propriedades da emissão de fluorescência e de fosforescência.

Tempo de vida e rendimento quântico de fluorescência.

Relaxação de solvente e desvio de Stokes.