Construção de DNAs recombinantes

10 Março 2020, 17:00 • Rita Zilhão

Construção de DNAs recombinantes

Condições de ligação e construção de DNAs recombinantes (vetores pNM/fragmento de 740 pb).

Purificação de fragmentos de DNA a partir de gel de agarose.

A aula indicada como sendo 3ªf às 17.00, decorre sempre no início do semestre, 2ªf às 17.00.

Não houve aula devido à quarentena decretada na UL a partir de 10 de Março. As aulas PLs, só tiveram início, por video-conferência e transformadas el TPs, a partir de 23 Março.

10 Março 2020, 09:00 • Rita Zilhão

Não houve aula devido à quarentena decretada na UL a partir de 10 de Março.

Construção de DNAs recombinantes

9 Março 2020, 12:30 • Rita Zilhão

Construção de DNAs recombinantes

Condições de ligação e construção de DNAs recombinantes (vetores pNM/fragmento de 740 pb).

Purificação de fragmentos de DNA a partir de gel de agarose.

A aula indicada como sendo 3ªf às 17.00, decorre sempre no início do semestre, 2ªf às 17.00.

1. Clonagem da região reguladora de um gene num vetor de expressão Objetivos da clonagem molecular Preparação dos vetores de clonagem e do fragmento de DNA a clonar

6 Março 2020, 14:00 • Rita Zilhão

Engenharia Genética geral

1.     Clonagem da região reguladora de um gene num vetor de expressão

Objetivos da clonagem molecular

Preparação dos vetores de clonagem e do fragmento de DNA a clonar

Digestão dos vetores pNM480/481/482 com as enzimas de restrição EcoRI/PstI.

Eletroforese em gel analítico Eletroforese em gel preparativo e purificação dos fragmentos EcoRI/PstI de 740 pb, a clonar nos vetores pNM480/481/482.

Eletroforese em gel preparativo do plasmídio recombinante pRZA18 digerido com EcoRI/PstI e purificação do fragmento de 740 pb, a clonar dos vetores pNM480/481/482.

Visualização em gel de agarose dos produtos de digestão dos vetores e do fragmento purificado, e avaliação das quantidades relativas de DNA (vetores e fragmento) a utilizar na clonagem.

CONCEITOS: purificação e armazenamento do DNA

1. Clonagem da região reguladora de um gene num vetor de expressão Objetivos da clonagem molecular Preparação dos vetores de clonagem e do fragmento de DNA a clonar

6 Março 2020, 10:30 • Rita Zilhão

Engenharia Genética geral

1.     Clonagem da região reguladora de um gene num vetor de expressão

Objetivos da clonagem molecular

Preparação dos vetores de clonagem e do fragmento de DNA a clonar

Digestão dos vetores pNM480/481/482 com as enzimas de restrição EcoRI/PstI.

Eletroforese em gel analítico Eletroforese em gel preparativo e purificação dos fragmentos EcoRI/PstI de 740 pb, a clonar nos vetores pNM480/481/482.

Eletroforese em gel preparativo do plasmídio recombinante pRZA18 digerido com EcoRI/PstI e purificação do fragmento de 740 pb, a clonar dos vetores pNM480/481/482.

Visualização em gel de agarose dos produtos de digestão dos vetores e do fragmento purificado, e avaliação das quantidades relativas de DNA (vetores e fragmento) a utilizar na clonagem.

CONCEITOS: purificação e armazenamento do DNA