Sumários
continuação do tema - Metodologia da manipulação génica e clonagem molecular geral
6 Março 2020, 08:00 • Rita Zilhão
continuação do tema - Metodologia da manipulação génica e clonagem molecular geral
Métodos de produção de fragmentos de DNA e de modificação de extremidades (DNA polimerases, fosfatases de DNA, transferase terminal; adição de linkers e adaptadores). A variedade de sistemas de clonagem. Noção de sistema vetor/hospedeiro. Características fundamentais dos vetores de clonagem: origem de replicação, marca de seleção, “polylinker”. Vetores shuttle. Vetores de clonagem: plasmídios.
1. Clonagem da região reguladora de um gene num vetor de expressão Objetivos da clonagem molecular Preparação dos vetores de clonagem e do fragmento de DNA a clonar
3 Março 2020, 17:00 • Rita Zilhão
Engenharia Genética geral
1. Clonagem da região reguladora de um gene num vetor de expressão
Objetivos da clonagem molecular
Preparação dos vetores de clonagem e do fragmento de DNA a clonar
Digestão dos vetores pNM480/481/482 com as enzimas de restrição EcoRI/PstI.
Eletroforese em gel analítico Eletroforese em gel preparativo e purificação dos fragmentos EcoRI/PstI de 740 pb, a clonar nos vetores pNM480/481/482.
Eletroforese em gel preparativo do plasmídio recombinante pRZA18 digerido com EcoRI/PstI e purificação do fragmento de 740 pb, a clonar dos vetores pNM480/481/482.
Visualização em gel de agarose dos produtos de digestão dos vetores e do fragmento purificado, e avaliação das quantidades relativas de DNA (vetores e fragmento) a utilizar na clonagem.
CONCEITOS: purificação e armazenamento do DNA
1. Clonagem da região reguladora de um gene num vetor de expressão Objetivos da clonagem molecular Preparação dos vetores de clonagem e do fragmento de DNA a clonar
3 Março 2020, 09:00 • Rita Zilhão
Engenharia Genética geral
1. Clonagem da região reguladora de um gene num vetor de expressão
Objetivos da clonagem molecular
Preparação dos vetores de clonagem e do fragmento de DNA a clonar
Digestão dos vetores pNM480/481/482 com as enzimas de restrição EcoRI/PstI.
Eletroforese em gel analítico Eletroforese em gel preparativo e purificação dos fragmentos EcoRI/PstI de 740 pb, a clonar nos vetores pNM480/481/482.
Eletroforese em gel preparativo do plasmídio recombinante pRZA18 digerido com EcoRI/PstI e purificação do fragmento de 740 pb, a clonar dos vetores pNM480/481/482.
Visualização em gel de agarose dos produtos de digestão dos vetores e do fragmento purificado, e avaliação das quantidades relativas de DNA (vetores e fragmento) a utilizar na clonagem.
CONCEITOS: purificação e armazenamento do DNA
1. Clonagem da região reguladora de um gene num vetor de expressão Objetivos da clonagem molecular Preparação dos vetores de clonagem e do fragmento de DNA a clonar
2 Março 2020, 12:30 • Rita Zilhão
Engenharia Genética geral
1. Clonagem da região reguladora de um gene num vetor de expressão
Objetivos da clonagem molecular
Preparação dos vetores de clonagem e do fragmento de DNA a clonar
Digestão dos vetores pNM480/481/482 com as enzimas de restrição EcoRI/PstI.
Eletroforese em gel analítico Eletroforese em gel preparativo e purificação dos fragmentos EcoRI/PstI de 740 pb, a clonar nos vetores pNM480/481/482.
Eletroforese em gel preparativo do plasmídio recombinante pRZA18 digerido com EcoRI/PstI e purificação do fragmento de 740 pb, a clonar dos vetores pNM480/481/482.
Visualização em gel de agarose dos produtos de digestão dos vetores e do fragmento purificado, e avaliação das quantidades relativas de DNA (vetores e fragmento) a utilizar na clonagem.
CONCEITOS: purificação e armazenamento do DNA
As aulas práticas só se iniciam a 2 de Março
28 Fevereiro 2020, 14:00 • Rita Zilhão
As aulas práticas só se iniciam a 2 de Março