Sumários
Aquisição de imagens no microscópio
5 Março 2026, 09:00 • Fernanda Murtinheira
Aquisição de imagens no microscópio de fluorescência a 40X, em grupos de 4–5 estudantes. Nesta sessão foram revistos os princípios da fluorescência e as características dos corantes utilizados. Cada grupo adquiriu imagens dos seus próprios grupos experimentais, tendo sido obtido material suficiente para quantificação da translocação de STAT3 para o núcleo na presença de LIF.
Microscopia de Fluorescência
27 Fevereiro 2026, 14:00 • Fernanda Murtinheira
No módulo de microscopia de fluorescência, o objetivo era preparar amostras celulares para análise da localização subcelular de proteínas (e.g., STAT3 e mutantes) em células HeLa STAT3-/-, recorrendo a marcação fluorescente.
Contextualização do modelo experimental:
Revisão do modelo experimental, incluindo as condições de cultura celular e o racional da estimulação com LIF.
Preparação das amostras:
Foram considerados grupos de células não tratadas e tratadas com LIF (100 ng/mL, 10 minutos). Antes do tratamento, as células foram incubadas em meio sem FBS. Após o tratamento, o meio foi removido e as células foram lavadas com PBS.
Fixação:
As células foram fixadas com metanol frio (-20 °C) durante 10 minutos, sendo discutidos os princípios e objetivos da técnica de fixação celular.
Marcação nuclear:
Após remoção do fixador e lavagem das células com PBS, realizou-se marcação nuclear com Hoechst (5 minutos, temperatura ambiente, no escuro), acompanhada da explicação do mecanismo de ação e da sua utilização em microscopia de fluorescência.
Discussão dos resultados esperados:
Discussão dos padrões de fluorescência esperados e da informação que poderá ser obtida relativamente à localização subcelular das proteínas em estudo.
Armazenamento das amostras:
Após as lavagens finais, as amostras foram acondicionadas e armazenadas para posterior observação por microscopia de fluorescência, sendo organizadas as sessões de aquisição por grupos e horários previamente estipulados.
Microscopia de Fluorescência
27 Fevereiro 2026, 09:00 • Fernanda Murtinheira
No módulo de microscopia de fluorescência, o objetivo era preparar amostras celulares para análise da localização subcelular de proteínas (e.g., STAT3 e mutantes) em células HeLa STAT3-/-, recorrendo a marcação fluorescente.
Contextualização do modelo experimental:
Revisão do modelo experimental, incluindo as condições de cultura celular e o racional da estimulação com LIF.
Preparação das amostras:
Foram considerados grupos de células não tratadas e tratadas com LIF (100 ng/mL, 10 minutos). Antes do tratamento, as células foram incubadas em meio sem FBS. Após o tratamento, o meio foi removido e as células foram lavadas com PBS.
Fixação:
As células foram fixadas com metanol frio (-20 °C) durante 10 minutos, sendo discutidos os princípios e objetivos da técnica de fixação celular.
Marcação nuclear:
Após remoção do fixador e lavagem das células com PBS, realizou-se marcação nuclear com Hoechst (5 minutos, temperatura ambiente, no escuro), acompanhada da explicação do mecanismo de ação e da sua utilização em microscopia de fluorescência.
Discussão dos resultados esperados:
Discussão dos padrões de fluorescência esperados e da informação que poderá ser obtida relativamente à localização subcelular das proteínas em estudo.
Armazenamento das amostras:
Após as lavagens finais, as amostras foram acondicionadas e armazenadas para posterior observação por microscopia de fluorescência, sendo organizadas as sessões de aquisição por grupos e horários previamente estipulados.
Microscopia de Fluorescência
26 Fevereiro 2026, 14:00 • Fernanda Murtinheira
No módulo de microscopia de fluorescência, o objetivo era preparar amostras celulares para análise da localização subcelular de proteínas (e.g., STAT3 e mutantes) em células HeLa STAT3-/-, recorrendo a marcação fluorescente.
Contextualização do modelo experimental:
Revisão do modelo experimental, incluindo as condições de cultura celular e o racional da estimulação com LIF.
Preparação das amostras:
Foram considerados grupos de células não tratadas e tratadas com LIF (100 ng/mL, 10 minutos). Antes do tratamento, as células foram incubadas em meio sem FBS. Após o tratamento, o meio foi removido e as células foram lavadas com PBS.
Fixação:
As células foram fixadas com metanol frio (-20 °C) durante 10 minutos, sendo discutidos os princípios e objetivos da técnica de fixação celular.
Marcação nuclear:
Após remoção do fixador e lavagem das células com PBS, realizou-se marcação nuclear com Hoechst (5 minutos, temperatura ambiente, no escuro), acompanhada da explicação do mecanismo de ação e da sua utilização em microscopia de fluorescência.
Discussão dos resultados esperados:
Discussão dos padrões de fluorescência esperados e da informação que poderá ser obtida relativamente à localização subcelular das proteínas em estudo.
Armazenamento das amostras:
Após as lavagens finais, as amostras foram acondicionadas e armazenadas para posterior observação por microscopia de fluorescência, sendo organizadas as sessões de aquisição por grupos e horários previamente estipulados.
Microscopia de fluorescência
26 Fevereiro 2026, 09:00 • Fernanda Murtinheira
No módulo de microscopia de fluorescência, o objetivo era preparar amostras celulares para análise da localização subcelular de proteínas (e.g., STAT3 e mutantes) em células HeLa STAT3-/-, recorrendo a marcação fluorescente.
Contextualização do modelo experimental:
Revisão do modelo experimental, incluindo as condições de cultura celular e o racional da estimulação com LIF.
Preparação das amostras:
Foram considerados grupos de células não tratadas e tratadas com LIF (100 ng/mL, 10 minutos). Antes do tratamento, as células foram incubadas em meio sem FBS. Após o tratamento, o meio foi removido e as células foram lavadas com PBS.
Fixação:
As células foram fixadas com metanol frio (-20 °C) durante 10 minutos, sendo discutidos os princípios e objetivos da técnica de fixação celular.
Marcação nuclear:
Após remoção do fixador e lavagem das células com PBS, realizou-se marcação nuclear com Hoechst (5 minutos, temperatura ambiente, no escuro), acompanhada da explicação do mecanismo de ação e da sua utilização em microscopia de fluorescência.
Discussão dos resultados esperados:
Discussão dos padrões de fluorescência esperados e da informação que poderá ser obtida relativamente à localização subcelular das proteínas em estudo.
Armazenamento das amostras:
Após as lavagens finais, as amostras foram acondicionadas e armazenadas para posterior observação por microscopia de fluorescência, sendo organizadas as sessões de aquisição por grupos e horários previamente estipulados.