4ª PL

25 Março 2024, 16:30 • Rita Zilhão

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Transformação de E.coli

4ª PL

25 Março 2024, 13:00 • Rita Zilhão

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Transformação de E.coli

3ª PL

22 Março 2024, 14:00 • Rita Zilhão

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Início protocolo transformação

Preparação de células competentes da estirpe hospedeira E. coli MC1061 pelo método de CaCl₂.

Preparação de caixas de meio seletivo (Amp/X-gal). Explicação do tipo de seleção.

3ª PL

22 Março 2024, 10:30 • Rita Zilhão

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Início protocolo transformação

Preparação de células competentes da estirpe hospedeira E. coli MC1061 pelo método de CaCl₂.

Preparação de caixas de meio seletivo (Amp/X-gal). Explicação do tipo de seleção.

cont. de 4. Clonagem de expressão e início de 5. Técnica de PCR e variantes

21 Março 2024, 08:00 • Rita Zilhão

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Clonagem de expressão em eucariotas. Vetores eucarióticos de expressão: plasmídios e vetores derivados de vírus. Marcas eucarióticas de seleção de clones recombinantes. Sistemas e estratégias de clonagem de expressão. Promotores constitutivos e indutivos.

Expressão transiente e expressão permanente. Sistemas de expressão génica induzível e condicional. Sistema tet-on/tet-off e sistema cre-lox.

5. Técnica de PCR e variantes

Revisão da história, princípios da técnica de PCR convencional e análise dos seus produtos.  Características das polimerases de DNA utilizadas em PCR. A escolha dos primers. Estratégias de clonagem de produtos de PCR.