Sumários

cont. 1. Clonagem da região reguladora de um gene num vetor de expressão

27 Março 2026, 10:30 Rita Zilhão

Início protocolo transformação

Preparação de células competentes da estirpe hospedeira E. coli MC1061 pelo método de CaCl2.

Preparação de caixas de meio seletivo (Amp/X-gal). Explicação do tipo de seleção.


cont. 2. Manipulação dos ácidos nucleicos: enzimologia, isolamento, quantificação e marcação e 3. Metodologia da manipulação génica e clonagem molecular geral

26 Março 2026, 08:00 Rita Zilhão

Enzimas de modificação: nucleases, polimerases, fosfatases e cinases. DNA ligases.

Os conceitos abaixo, de manipulação de ácidos nucleicos (leccionados na disciplina de Fundamentos de Biologia Molecular, 2º ano TC), vão sendo revistos durante as as diferentes aulas práticaspropriedades físicas e químicas dos ácidos nucleicos e os seus métodos de visualização e quantificação. Fundamento de alguns processos de isolamento e purificação dos ácidos nucleicos. Métodos de quantificação dos ácidos nucleicos baseados na espectrofotometria e em matrizes (agarose e poliacrilamida) sujeitas a eletroforese. Mapa de restrição.

 

3. Metodologia da manipulação génica e clonagem molecular geral

Clonagem molecular: significado, objetivos e etapas. O papel dos ácidos nucleicos na clonagem molecular. Construção de moléculas de DNA recombinante. Preparação de DNA vetor e DNA dador. Estratégias de ligação de DNA vetor e DNA dador (ligases de DNA). Clonagem dirigida e clonagem não dirigida.


cont. 1. Clonagem da região reguladora de um gene num vetor de expressão

24 Março 2026, 09:00 Rita Zilhão

Início protocolo transformação

Preparação de células competentes da estirpe hospedeira E. coli MC1061 pelo método de CaCl2.

Preparação de caixas de meio seletivo (Amp/X-gal). Explicação do tipo de seleção.


cont. 1. Clonagem da região reguladora de um gene num vetor de expressão

23 Março 2026, 16:30 Rita Zilhão

Início protocolo transformação

Preparação de células competentes da estirpe hospedeira E. coli MC1061 pelo método de CaCl2.

Preparação de caixas de meio seletivo (Amp/X-gal). Explicação do tipo de seleção.


cont. 1. Clonagem da região reguladora de um gene num vetor de expressão

23 Março 2026, 13:00 Rita Zilhão

Início protocolo transformação

Preparação de células competentes da estirpe hospedeira E. coli MC1061 pelo método de CaCl2.

Preparação de caixas de meio seletivo (Amp/X-gal). Explicação do tipo de seleção.