Sumários

cont. ponto 2. Manipulação dos ácidos nucleicos: enzimologia, isolamento, quantificação e marcação e 3. Metodologia da manipulação génica e clonagem molecular geral

26 Fevereiro 2026, 08:00 • Rita Zilhão

Enzimas de modificação: nucleases, polimerases, fosfatases e cinases. DNA ligases.

Os conceitos abaixo, de manipulação de ácidos nucleicos (leccionados na disciplina de Fundamentos de Biologia Molecular, 2º ano TC), vão sendo revistos durante as as diferentes aulas práticas: propriedades físicas e químicas dos ácidos nucleicos e os seus métodos de visualização e quantificação. Fundamento de alguns processos de isolamento e purificação dos ácidos nucleicos. Métodos de quantificação dos ácidos nucleicos baseados na espectrofotometria e em matrizes (agarose e poliacrilamida) sujeitas a eletroforese. Mapa de restrição.

 

3. Metodologia da manipulação génica e clonagem molecular geral

Clonagem molecular: significado, objetivos e etapas. O papel dos ácidos nucleicos na clonagem molecular. Construção de moléculas de DNA recombinante. Preparação de DNA vetor e DNA dador. Estratégias de ligação de DNA vetor e DNA dador (ligases de DNA). Clonagem dirigida e clonagem não dirigida.


Preparação de células competentes e de caixas de meio seletivo

24 Fevereiro 2026, 09:00 • Rita Zilhão

Preparação de células competentes da estirpe hospedeira E. coli MC1061 pelo método de CaCl2.

Preparação de caixas de meio seletivo (Amp/X-gal). Explicação do tipo de seleção.


Preparação de células competentes e de caixas de meio seletivo

23 Fevereiro 2026, 16:30 • Rita Zilhão

Preparação de células competentes da estirpe hospedeira E. coli MC1061 pelo método de CaCl2.

Preparação de caixas de meio seletivo (Amp/X-gal). Explicação do tipo de seleção.


Preparação de células competentes e de células competentes

23 Fevereiro 2026, 13:00 • Rita Zilhão

Preparação de células competentes da estirpe hospedeira E. coli MC1061 pelo método de CaCl2.

Preparação de caixas de meio seletivo (Amp/X-gal). Explicação do tipo de seleção.


Construção de DNAs recombinantes

20 Fevereiro 2026, 14:00 • Rita Zilhão

Visualização em gel de agarose dos produtos de digestão dos vetores e do fragmento purificado, e avaliação das quantidades relativas de DNA (vetores e fragmento) a utilizar na clonagem.

Construção de DNAs recombinantes

Condições de ligação e construção de DNAs recombinantes (vetores pNM/fragmento de 740 pb).