Sumários

cont. ponto 2. Manipulação dos ácidos nucleicos: enzimologia, isolamento, quantificação e marcação e 3. Metodologia da manipulação génica e clonagem molecular geral

26 Fevereiro 2026, 08:00 Rita Zilhão

Enzimas de modificação: nucleases, polimerases, fosfatases e cinases. DNA ligases.

Os conceitos abaixo, de manipulação de ácidos nucleicos (leccionados na disciplina de Fundamentos de Biologia Molecular, 2º ano TC), vão sendo revistos durante as as diferentes aulas práticaspropriedades físicas e químicas dos ácidos nucleicos e os seus métodos de visualização e quantificação. Fundamento de alguns processos de isolamento e purificação dos ácidos nucleicos. Métodos de quantificação dos ácidos nucleicos baseados na espectrofotometria e em matrizes (agarose e poliacrilamida) sujeitas a eletroforese. Mapa de restrição.

 

3. Metodologia da manipulação génica e clonagem molecular geral

Clonagem molecular: significado, objetivos e etapas. O papel dos ácidos nucleicos na clonagem molecular. Construção de moléculas de DNA recombinante. Preparação de DNA vetor e DNA dador. Estratégias de ligação de DNA vetor e DNA dador (ligases de DNA). Clonagem dirigida e clonagem não dirigida.


Preparação de células competentes e de caixas de meio seletivo

24 Fevereiro 2026, 09:00 Rita Zilhão

Preparação de células competentes da estirpe hospedeira E. coli MC1061 pelo método de CaCl2.

Preparação de caixas de meio seletivo (Amp/X-gal). Explicação do tipo de seleção.


Preparação de células competentes e de caixas de meio seletivo

23 Fevereiro 2026, 16:30 Rita Zilhão

Preparação de células competentes da estirpe hospedeira E. coli MC1061 pelo método de CaCl2.

Preparação de caixas de meio seletivo (Amp/X-gal). Explicação do tipo de seleção.


Preparação de células competentes e de células competentes

23 Fevereiro 2026, 13:00 Rita Zilhão

Preparação de células competentes da estirpe hospedeira E. coli MC1061 pelo método de CaCl2.

Preparação de caixas de meio seletivo (Amp/X-gal). Explicação do tipo de seleção.


Construção de DNAs recombinantes

20 Fevereiro 2026, 14:00 Rita Zilhão

Visualização em gel de agarose dos produtos de digestão dos vetores e do fragmento purificado, e avaliação das quantidades relativas de DNA (vetores e fragmento) a utilizar na clonagem.

Construção de DNAs recombinantes

Condições de ligação e construção de DNAs recombinantes (vetores pNM/fragmento de 740 pb).