Sumários
Início dos protocolos sobre o tema "Clonagem da região reguladora de um gene num vetor de expressão"
4 Março 2022, 14:00 • Rita Zilhão
1. Clonagem da região reguladora de um gene num vetor de expressão
Objetivos da clonagem molecular
Preparação dos vetores de clonagem e do fragmento de DNA a clonar
Digestão dos vetores pNM480/481/482 com as enzimas de restrição EcoRI/PstI.
Eletroforese em gel analítico
Início dos protocolos sobre o tema "Clonagem da região reguladora de um gene num vetor de expressão"
4 Março 2022, 10:30 • Rita Zilhão
1. Clonagem da região reguladora de um gene num vetor de expressão
Objetivos da clonagem molecular
Preparação dos vetores de clonagem e do fragmento de DNA a clonar
Digestão dos vetores pNM480/481/482 com as enzimas de restrição EcoRI/PstI.
Eletroforese em gel analítico
Enzimologia do DNA recombinante.
4 Março 2022, 08:00 • Rita Zilhão
Enzimologia do DNA recombinante. Enzimas de restrição. Enzimas de restrição de tipo II. Mapa de restrição. Importância dos sistemas de restrição/modificação em clonagem molecular. Isoesquizómeros.
Isoesquizómeros. Enzimas de modificação: nucleases, polimerases, fosfatases e cinases. DNA ligases. Propriedades físicas e químicas dos ácidos nucleicos e os seus métodos de visualização e quantificação. Fundamento de alguns processos de isolamento e purificação dos ácidos nucleicos. Métodos de quantificação dos ácidos nucleicos baseados na espectrofotometria e em matrizes (agarose e poliacrilamida) sujeitas a eletroforese.