Digestões enzimáticas para confirmação recombinantes

4 Abril 2022, 12:30 • Rita Zilhão

Digestão com EcoRI/PstI dos DNAs dos clones selecionados.

Eletroforese em gel de agarose para confirmação da presença do fragmento de 740 pb nos DNAs recombinantes selecionados

Digestões enzimáticas para confirmação recombinantes

1 Abril 2022, 14:00 • Rita Zilhão

Digestão com EcoRI/PstI dos DNAs dos clones selecionados.

Eletroforese em gel de agarose para confirmação da presença do fragmento de 740 pb nos DNAs recombinantes selecionados

Digestões enzimáticas para confirmação recombinantes

1 Abril 2022, 10:30 • Rita Zilhão

Digestão com EcoRI/PstI dos DNAs dos clones selecionados.

Eletroforese em gel de agarose para confirmação da presença do fragmento de 740 pb nos DNAs recombinantes selecionados

Continuação clonagem de expressão. Técnica de PCR e variantes

1 Abril 2022, 08:00 • Rita Zilhão

Clonagem de expressão em eucariotas. Vetores eucarióticos de expressão: plasmídios e vetores derivados de vírus. Marcas eucarióticas de seleção de clones recombinantes. Sistemas e estratégias de clonagem de expressão. Promotores constitutivos e indutivos.

Expressão transiente e expressão permanente. Sistemas de expressão génica induzível e condicional. Sistema tet-on/tet-off e sistema cre-lox.

5. Técnica de PCR e variantes

Revisão da história, princípios da técnica de PCR convencional e análise dos seus produtos.

Análise dos clones transformantes

29 Março 2022, 17:00 • Rita Zilhão

Análise dos clones transformantes

Análise e interpretação dos resultados obtidos na transformação de E. coli.

Repicagem dos transformantes para caixas de meio seletivo Amp/X-gal.

Extração de DNA plasmídico dos transformantes, a partir de culturas de 18h de incubação.