Sumários
Metodologias em terapia génica humana.
6 Outubro 2023, 09:00 • Rita Zilhão
Metodologias em terapia génica humana. Definição de terapia génica. Os princípios de terapia génica. Metodologias e estratégias utilizadas em terapia génica humana: adição de genes, correção dirigida de mutações, inativação da expressão génica, morte dirigida de células. As doenças alvo e a diferente aplicação destas estratégias e metodologias. As fases de experimentação até clínica. A metodologia de transferência de genes. Vetores utilizados em terapia génica: não virais e virais (retrovirais, adenovirais, lentivirais e adeno-associados); vantagens, desvantagens e principais aplicações. Construção de vetores virais. Histórias de sucesso, estado de arte e perspetivas da terapia génica. Exercícios.
Metodologias em terapia génica humana.
6 Outubro 2023, 08:00 • Rita Zilhão
Metodologias em terapia génica humana. Definição de terapia génica. Os princípios de terapia génica. Metodologias e estratégias utilizadas em terapia génica humana: adição de genes, correção dirigida de mutações, inativação da expressão génica, morte dirigida de células. As doenças alvo e a diferente aplicação destas estratégias e metodologias. As fases de experimentação até clínica. A metodologia de transferência de genes. Vetores utilizados em terapia génica: não virais e virais (retrovirais, adenovirais, lentivirais e adeno-associados); vantagens, desvantagens e principais aplicações. Construção de vetores virais. Histórias de sucesso, estado de arte e perspetivas da terapia génica. Exercícios.
Técnicas de obtenção de organismos transgénicos
4 Outubro 2023, 08:00 • Rita Zilhão
Técnicas de obtenção de organismos transgénicos.
Como estabelecer e as estratégias das construções moleculares. A inserção aleatória, os efeitos de posição e gene targeting. Os cruzamentos necessários para a obtenção do transgene. A noção de organismo founder. Estratégias de seleção de inserção em locais específicos. Sistemas de expressão induzíveis (Tet ON/Tet OFF) e condicionais (os sistemas Cre/loxP e FLP/FRT). Modificação dirigida de genomas através de nucleases específicas e o sistema CRISPR. Confirmação da obtenção de um transgene. Transgénicos em diferentes modelos animais (ratinho, galinha, zebrafish). Preocupações éticas.
Continuação da do tema de PCR em tempo real e início Técnicas de obtenção de organismos transgénicos
2 Outubro 2023, 09:00 • Rita Zilhão
Continuação da do tema de PCR em tempo real: Métodos de quantificação – quantificação absoluta (método da curva padrão), quantificação relativa (método da curva padrão, delta delta Ct e Pfaffl). PCR qualitativo – discriminação alélica, a importância da curva de fusão (melting curve). Aplicações do qPCR.
Técnicas de obtenção de organismos transgénicos. O que é um organismo transgénico, objectivos da sua construção e suas aplicações. Como se geram animais transgénicos – a escolha do transgene, as estratégias da construção molecular e a expressão do transgene. As células alvo na construção de um transgénico. Métodos de transferência génica.
Continuação da do tema de PCR em tempo real e início Técnicas de obtenção de organismos transgénicos.
2 Outubro 2023, 08:00 • Rita Zilhão
Continuação da do tema de PCR em tempo real: Métodos de quantificação – quantificação absoluta (método da curva padrão), quantificação relativa (método da curva padrão, delta delta Ct e Pfaffl). PCR qualitativo – discriminação alélica, a importância da curva de fusão (melting curve). Aplicações do qPCR.
Técnicas de obtenção de organismos transgénicos. O que é um organismo transgénico, objectivos da sua construção e suas aplicações. Como se geram animais transgénicos – a escolha do transgene, as estratégias da construção molecular e a expressão do transgene. As células alvo na construção de um transgénico. Métodos de transferência génica.