Sumários
Imunocitoquímica, imunohostoquímica.
22 Setembro 2023, 09:00 • Rita Zilhão
Imunocitoquímica, imunohostoquímica. Reacção antigénio anticorpo. O tipo de amostras. Preparação das amostras: adesão, fixação, permeabilização, seccionamento, recuperação antigénios. Tipos de anticorpos. A escolha e a marcação dos anticorpos primários e secundários. Sistemas de marcação e deteção e amplificação de sinal. Processos de bloqueio. Montagem das amostras. Counterstaining. Análise por diferentes tipos de microscopia. Controlos positivos e negativos. Artefactos, problemas e soluções (ex. atividade cruzada de anticorpos e a utilização de anticorpos pré-adsorvidos), conselhos. Exemplos, aplicações e exercícios.
Imunocitoquímica, imunohostoquímica.
22 Setembro 2023, 08:00 • Rita Zilhão
Imunocitoquímica, imunohostoquímica. Reacção antigénio anticorpo. O tipo de amostras. Preparação das amostras: adesão, fixação, permeabilização, seccionamento, recuperação antigénios. Tipos de anticorpos. A escolha e a marcação dos anticorpos primários e secundários. Sistemas de marcação e deteção e amplificação de sinal. Processos de bloqueio. Montagem das amostras. Counterstaining. Análise por diferentes tipos de microscopia. Controlos positivos e negativos. Artefactos, problemas e soluções (ex. atividade cruzada de anticorpos e a utilização de anticorpos pré-adsorvidos), conselhos. Exemplos, aplicações e exercícios.
Continuação do PCR em tempo real
20 Setembro 2023, 08:00 • Rita Zilhão
Continuação do PCR em tempo real: O fenómeno de FRET. Sondas de hidrólise (ex. Taqman), sondas estruturadas (ex. Molecular Beacon), sondas de hibridação (ex. Light Cycler). Vantagens e desvantagens dos diferentes sistemas de deteção.
A escolha dos controlos positivos e negativos. A escolha do controlo endógeno. Ensaios de validação, cálculo da eficiência e curvas padrão. Interpretação dos resultados de qPCR e quantificação. Planeamento de um ensaio de PCR.
Interrupção aula devido a alarme de fogo.
Apresentação e explicação da organização da disciplina. PCR em tempo real.
18 Setembro 2023, 09:00 • Rita Zilhão
Apresentação e explicação da organização da disciplina.
PCR em tempo real. Princípios do PCR em tempo real. O parâmetro de medição da fluorescência: Ct (threshold cycle). Sistemas de deteção – compostos de ligação ao DNA não específicos, sondas específicas de sequências.
Apresentação e explicação da organização da disciplina. PCR em tempo real.
18 Setembro 2023, 08:00 • Rita Zilhão
Apresentação e explicação da organização da disciplina.
PCR em tempo real. Princípios do PCR em tempo real. O parâmetro de medição da fluorescência: Ct (threshold cycle). Sistemas de deteção – compostos de ligação ao DNA não específicos, sondas específicas de sequências.