Sumários
Compensação para TPs de 21 Out a 2 Nov
10 Outubro 2016, 10:00 • Rita Zilhão
Compensação de horas nas TPs de 3 h que decorreram do dia 21 de Outubro a 2 de Novembro
Continuação do tema "Citometria de fluxo"
10 Outubro 2016, 09:00 • Rita Zilhão
Continuação do tema citometria de fluxo: Esquema de um painel de análise por citometria: que alvos celulares (antigénios) que anticorpos, que fluorocromos. Cuidados a ter nas combinações de fluorocromos: spillover, densidade antigénica. Aplicações e exemplos da citometria de fluxo: estudos de função celular (diferenciação, proliferação, apoptose). Diferenciação celular: análise do estado de activação das células, identificação de antigénios de superfície e intracelulares (vias de sinalização). Proliferação: análise da divisão celular (CFSE e VP450) e análise do ciclo celular (iodeto de propídio e BRdU). Apoptose (iodeto de propídio, anexina V). Controlos, variantes técnicas e problemas.
Compensação para TPs de 21 Out a 2 Nov
7 Outubro 2016, 09:00 • Rita Zilhão
Compensação de horas nas TPs de 3 h que decorreram do dia 21 de Outubro a 2 de Novembro
Citometria de fluxo
7 Outubro 2016, 08:00 • Rita Zilhão
Citometria de fluxo. O que é a citometria de fluxo, como se mede. Princípios e vantagens da citometria. Diferentes citómetros. Componentes do citómetro. Sistema de fluidos, sistema óptico e sistema electrónico. A importância do ponto de interrogação e das diferentes presses dos fluidos. Noção da hidrodinâmica da focagem. Os lasers e os seus múltiplos sistemas. Medição de luz dispersa (SSC e FSC) e de fluorescência. Os filtros ópticos. Os parâmetros electrónicos de detecção. A discriminação dos doublets. O estabelecimento do threshold. Aquisição de dados e processamento. O que se detecta e como: histogramas, dots plots, contour plots. O gating. O que se mede e como se reportam os dados obtidos. Esquema global de uma experiência de citometria e o que em cada passo está envolvido: 1- Pergunta biológica; 2- Conhecimento do aparelho; 3- Seleção dos reagentes (ex. escolha dos fluorocromos adequados e de anticorpos) e controlos; 4- Optimização do protocolo (ex. Concentração de células); 5- Configuração do instrumento; 6- Aquisição das amostras e controlos; 7- Análise (fontes de variabilidade e controlos); 8- Publicação (imagens e materiais e métodos).
Compensação para TPs de 21 Out a 2 Nov
3 Outubro 2016, 10:00 • Rita Zilhão
Compensação de horas nas TPs de 3 h que decorreram do dia 21 de Outubro a 2 de Novembro