Sumários
Aula prática 1 - ouriço do mar
7 Março 2023, 08:00 • Solveig Thorsteinsdottir
Fertilização o
desenvolvimento precoce no ouriço-do-mar ao vivo.
Objectivo 1:
Observação de oócitos e espermatozóides
Objectivo 2:
Observação da fertilização.
Objectivo 3:
Observação das modificações que ocorrem ao nível do núcleo e citoplasma até a
primeira divisão mitotica. Observação da segunda clivagem. Opcional: obervação
de gastrulas e larvas pluteus no dia seguinte.
Objectivo 4: Executar
uma experiência que testa o efeito da concentração dos espermatozóides no (1)
sucesso da fertilização e (2) a incidência de polispermia. Elaboração de um
gráfico com os resultados obtidos.
Protocolo
da aula:
Observação
de oócitos:
·
Colocar uma gota de oócitos em água do mar numa lâmina e observar no
microscópio (obj. 10x - não usar a objectiva de 40x!!). Identificar
oócitos maduros e imaturos.
·
Adicionar uma gota muito pequena de tinta de China e misturar
com um palito. Observar a geleia.
Observação
de espermatozóides:
(só
podem usar a objetiva de 40x COM LAMELA - a água do mar destrói objectivas!).
·
Preparar sémen diluído em água do mar. Observar com a objetiva de 10x sem
lamela e depois colocar uma lamela e observar com a objetiva
de 40x
Fertilização:
·
Preparar uma caixa de Petri com oócitos em água do mar. Colocar uma gota de
oócitos numa lâmina, colocar no microscópio e focar com a objetiva de
10x.
·
A docente adiciona esperma diluído à caixa de Petri (vai ser usado para
observar as fases de clivagem) e coloca uma gota de esperma na lâmina.
·
Juntar a gota de esperma com a gota de oócitos usando um palito. Observar a
fertilização.
Clivagem:
·
Retirar uma gota de embriões em clivagem da caixa de Petri e observar sem
lamela com a objetiva de 10x. Observar a alteração ao nível do núcleo e a
formação do fuso mitótico.Observar a 1ª divisão mitótica (±40-50* min após a
fertilização), a 2ª divisão mitótica (10-15* min após a 1ª) e a 3ª divisão
mitótica (10-15* min após a 2ª). *depende da temperatura da
sala
Aula 5
6 Março 2023, 15:00 • Solveig Thorsteinsdottir
Continuação da aula anterior: O terceiro
nível: inhibição selectiva de tradução do mRNA (e.g. através de determinadas
proteínas que bloqueiam a tradução; através de miRNAs). Exemplos (e.g. a
“limpeza” de mRNA maternos no embrião do peixe zebra). Quarto nível:
processamento pós-traducionais de proteínas.
A comunicação célula-célula no
desenvolvimento animal pode-se dividir comunicação justácrina e comunicação
parácrina, mas estas divisões não são sempre aplicáveis.
A adesão célula-célula. História
dos seus estudos e identificação das moléculas envolvidas. O papel das
caderinas na separação dos tecidos (e.g. E-caderina e N-caderina durante a
neurulação e a migração da crista neural).
Sinalização notch – mecanismo de ligação ao delta e libertação
da notch intracellular domain. Activação génica e downregulação do delta. O
papel de sinalização notch na diferenciação no tubo neural (inibição lateral).
As efs-efrinas – mecanismo de
funcionamento. A repulsão entre células expressando efs vs efrinas. O papel da
repulsão na morfogénese. Exemplos.
A matriz extracelular. A matriz
intersticial vs as membranas basais. Principais componentes da matriz
extracelular: colagénios, glicoproteínas, proteoglicanos/glicosaminoglicanos. A
formação de matrizes de fibronectina, mecanismos. O papel da fibronectina no
desenvolvimento animal. A tenascina. A sua distribuição nos tecidos e potencial
papel. A laminina. As variantes da laminina e a organização molecular das
membranas basais. Exemplos do papel das membranas basais. Os receptores da
matriz extracelular: as integrinas. Estrutura, ligação ao citoesqueléto e
associação à molecular sinalizadoras. Proteoglicanos e glicosaminoglicanos. O
seu papel na consistência dos tecidos.
Não houve aula
2 Março 2023, 17:30 • Solveig Thorsteinsdottir
Não houve aula teórica devido a doença da docente.
A PL23 não tem aula prática nesta semana
28 Fevereiro 2023, 13:00 • Solveig Thorsteinsdottir
A BDA tem uma carga horária de aulas práticas de 2h por
semana mas são lecionadas em aulas de 4h 15 em 15 dias. Sendo assim nesta data,
esta turma não teve aula prática.
A PL22 não tem prática nesta semana
28 Fevereiro 2023, 08:00 • Solveig Thorsteinsdottir
A BDA tem uma carga horária de aulas práticas de 2h por
semana mas são lecionadas em aulas de 4h 15 em 15 dias. Sendo assim nesta data,
esta turma não teve aula prática.