Sumários
A PL23 não teve aula nesta semana
14 Março 2023, 13:00 • Solveig Thorsteinsdottir
A BDA tem uma carga horária de aulas práticas de 2h por
semana mas são lecionadas em aulas de 4h 15 em 15 dias. Sendo assim nesta data,
esta turma não teve aula prática.
A PL22 não teve aula prática nesta semana
14 Março 2023, 08:00 • Solveig Thorsteinsdottir
A BDA tem uma carga horária de aulas práticas de 2h por
semana mas são lecionadas em aulas de 4h 15 em 15 dias. Sendo assim nesta data,
esta turma não teve aula prática.
Aula prática 2 - embrião de galinha
14 Março 2023, 08:00 • Solveig Thorsteinsdottir
Realização por parte dos alunos da colheita de embriões de galinha de 2 e 3 dias partir de ovos galados incubados. Observação dos embriões a lupa e determinação do estádio HH. Fixação dos embriões em fixador 4% PFA em PBS
Protocolo
da aula:
OBSERVAÇÃO
DE EMBRIÕES DE GALINHA (2-3 dias) E A SUA FIXAÇÃO
1.
Lava
o material cirúrgico com álcool e deixa secar.
2.
Retira
um ovo da incubadora, orienta-o com o lado ponteagudo para cima e fura a parte
redonda (parte de baixo) com uma pinça grossa.
3.
Corta
a casca na parte ponteagúda com uma tesoura grossa e retira “a tampa” do ovo.
Abre o suficiente para ver a gema e o embrião.
4.
Se o
embrião for visível, coloca o ovo num suporte, retira o embrião da gema e
coloca-o numa caixa de Petri grande (diâmetro 10 cm) com “Phosphate Buffered
Saline” (PBS). Se o embrião não for visível, coloca o conteúdo do ovo numa
caixa de Petri grande e procura o embrião. Método para tirar o embrião
da gema: corta a membrana da gema à volta do embrião e remove o
embrião com uma colher de café.
5.
Observa
o embrião na lupa. Remove a gema a volta do embrião e, utilizando uma pipeta de
Pasteur de plástico com a ponta cortada, transfere-o para uma caixa de Petri
com PBS limpo. Quando tiver completamente livre de gema, transfere o embrião
para uma caixa de Petri com fundo preto.
6.
Observa
o embrião à lupa e determina o estádio HH, utilizando a tabela de
desenvolvimento de Hamburger e Hamilton. Consulta tanto as imagens de embriões
como a descrição de cada estádio para determinar com rigor o estádio do
embrião.
7.
Leva
o embrião para a hotte e transfere para um tubo com fixador 4% PFA em PBS.
Aula prática 1 - ouriço do mar
7 Março 2023, 13:00 • Solveig Thorsteinsdottir
Fertilização o
desenvolvimento precoce no ouriço-do-mar ao vivo.
Objectivo 1:
Observação de oócitos e espermatozóides
Objectivo 2:
Observação da fertilização.
Objectivo 3:
Observação das modificações que ocorrem ao nível do núcleo e citoplasma até a
primeira divisão mitotica. Observação da segunda clivagem. Opcional: obervação
de gastrulas e larvas pluteus no dia seguinte.
Objectivo 4: Executar
uma experiência que testa o efeito da concentração dos espermatozóides no (1)
sucesso da fertilização e (2) a incidência de polispermia. Elaboração de um
gráfico com os resultados obtidos.
Protocolo
da aula:
Observação
de oócitos:
·
Colocar uma gota de oócitos em água do mar numa lâmina e observar no
microscópio (obj. 10x - não usar a objectiva de 40x!!). Identificar
oócitos maduros e imaturos.
·
Adicionar uma gota muito pequena de tinta de China e misturar
com um palito. Observar a geleia.
Observação
de espermatozóides:
(só
podem usar a objetiva de 40x COM LAMELA - a água do mar destrói objectivas!).
·
Preparar sémen diluído em água do mar. Observar com a objetiva de 10x sem
lamela e depois colocar uma lamela e observar com a objetiva
de 40x
Fertilização:
·
Preparar uma caixa de Petri com oócitos em água do mar. Colocar uma gota de
oócitos numa lâmina, colocar no microscópio e focar com a objetiva de
10x.
·
A docente adiciona esperma diluído à caixa de Petri (vai ser usado para
observar as fases de clivagem) e coloca uma gota de esperma na lâmina.
·
Juntar a gota de esperma com a gota de oócitos usando um palito. Observar a
fertilização.
Clivagem:
·
Retirar uma gota de embriões em clivagem da caixa de Petri e observar sem
lamela com a objetiva de 10x. Observar a alteração ao nível do núcleo e a
formação do fuso mitótico.Observar a 1ª divisão mitótica (±40-50* min após a
fertilização), a 2ª divisão mitótica (10-15* min após a 1ª) e a 3ª divisão
mitótica (10-15* min após a 2ª). *depende da temperatura da
sala
A PL21 não teve aula prática nesta semana
7 Março 2023, 08:00 • Solveig Thorsteinsdottir
A BDA tem uma carga horária de aulas práticas de 2h por
semana mas são lecionadas em aulas de 4h 15 em 15 dias. Sendo assim nesta data,
esta turma não teve aula prática.