Imunocitoquímica III: Microscopía

27 Abril 2023, 14:00 • Federico Herrera Garcia

Nesta sessão, os estudantes tiveram de adquirir imagens suficientes para efetuarem uma análise quantitativa com o software gratuito ImageJ. Foi-lhes ensinado como utilizar o software do microscópio, e os princípios por detrás do microscópio. Os objectivos, as fontes de iluminação e o próprio microscópio foram descritos em pormenor. Tiraram fotografias de cada grupo experimental até obterem entre 50 e 100 células por condição experimental. Tiraram estas imagens numa pendrive para análise de imagem mais tarde.

Imunocitoquímica III: Microscopía

27 Abril 2023, 09:00 • Federico Herrera Garcia

Nesta sessão, os estudantes tiveram de adquirir imagens suficientes para efetuarem uma análise quantitativa com o software gratuito ImageJ. Foi-lhes ensinado como utilizar o software do microscópio, e os princípios por detrás do microscópio. Os objectivos, as fontes de iluminação e o próprio microscópio foram descritos em pormenor. Tiraram fotografias de cada grupo experimental até obterem entre 50 e 100 células por condição experimental. Tiraram estas imagens numa pendrive para análise de imagem mais tarde.

Dinâmica da Localização do Factor NF-B em células HeLa estimuladas com TNF- - Western Blot (Dia 3)

14 Abril 2023, 09:30 • Carlos Miguel Ribeiro da Silva Farinha

Dinâmica da Localização do Factor NF-kB 

em células HeLa estimuladas com TNF-a - Western Blot (Dia 3)

Dinâmica da Localização do Factor NF-B em células HeLa estimuladas com TNF- - Western Blot (Dia 2)

13 Abril 2023, 09:30 • Carlos Miguel Ribeiro da Silva Farinha

Dinâmica da Localização do Factor NF-kB 

em células HeLa estimuladas com TNF-a - Western Blot (Dia 2)

Imunocitoquímica II: Anticorpos Secundários

31 Março 2023, 09:00 • Federico Herrera Garcia

Nesta etapa, os alunos só tinham de adicionar os anticorpos secundários às amostras e incubá-las à temperatura ambiente e na escuridão durante 2 horas. Resumidamente, os anticorpos primários foram lavados com 3 lavagens com PBS durante 10 min cada, os anticorpos secundários numa solução de BSA 1% foram adicionados às amostras e, após 2 horas, os anticorpos secundários foram lavados com PBS 3 vezes durante 10 min cada. As lamelas de vidro com as células foram então montadas em lâminas de vidro com meio de montagem, e seladas com verniz de unhas. Durante os tempos de incubação, expliquei em detalhe os princípios subjacentes a estas etapas e antecipei o trabalho que faríamos no microscópio no dia seguinte.