Análise dos clones transformantes

3 Abril 2017, 12:30 • Rita Zilhão

Análise dos clones transformantes

Análise e interpretação dos resultados obtidos na transformação de E. coli.

Repicagem dos transformantes para caixas de meio selectivo Amp/X-gal.

Extracção de DNA plasmídico dos transformantes, a partir de culturas de 18h de incubação.

Digestão com EcoRI/PstI dos DNAs dos clones selecionados.

Análise dos clones transformantes

31 Março 2017, 10:30 • Rita Zilhão

Análise dos clones transformantes

Análise e interpretação dos resultados obtidos na transformação de E. coli.

Repicagem dos transformantes para caixas de meio selectivo Amp/X-gal.

Extracção de DNA plasmídico dos transformantes, a partir de culturas de 18h de incubação.

Digestão com EcoRI/PstI dos DNAs dos clones selecionados.

Continuação do tema "Clonagem de expressão" e início do tema "Técnica de PCR e variantes"

31 Março 2017, 08:00 • Rita Zilhão

Vectores eucarióticos de expressão: plasmídios e vectores derivados de vírus. Marcas eucarióticas de selecção de clones recombinantes. Sistemas e estratégias de clonagem de expressão. Promotores constitutivos e indutivos. Expressão transiente e expressão permanente. Sistemas de expressão génica induzível e condicional. Sistema tet-on/tet-off e sistema cre-lox.

5. Técnica de PCR e variantes

História do PCR. Princípios da técnica de PCR convencional e análise dos seus produtos. Características das polimerases de DNA utilizadas em PCR. A escolha dos primers. Estratégias de clonagem de produtos de PCR. 

Continuação do protocolo da transformação de E. coli

28 Março 2017, 17:00 • Rita Zilhão

Continuação do protocolo da transformação de E. coli: transformação de E. coli MC1061 com as misturas de ligação.

Continuação do protocolo da transformação de E. coli

28 Março 2017, 09:00 • Rita Zilhão

Continuação do protocolo da transformação de E. coli: transformação de E. coli MC1061 com as misturas de ligação.