Sumários

Continuação do protocolo da transformação de E. coli

27 Março 2017, 12:30 Rita Zilhão

Continuação do protocolo da transformação de E. coli: transformação de E. coli MC1061 com as misturas de ligação.


Continuação do protocolo da transformação de E. coli

24 Março 2017, 10:30 Rita Zilhão

Continuação do protocolo da transformação de E. coli: transformação de E. coli MC1061 com as misturas de ligação.


4. Clonagem de expressão

24 Março 2017, 08:00 Rita Zilhão

4. Clonagem  de expressão

Sistemas de expressão homóloga e heteróloga de genes. Vantagens e desvantagens da expressão heteróloga em E. coli. Expressão citoplasmática e expressão periplasmática ou secreção extracelular. Corpos de inclusão. Configuração de vectores procarióticos de expressão. Fusões transcricionais e fusões traducionais. Construção de proteínas híbridas ou de fusão. Tags e genes repórter. Construção de proteínas híbridas ou de fusão. Tags e genes repórter. Produção de proteínas recombinantes em E. coli e em leveduras. Colunas de afinidade. Sistemas de detecção e purificação de proteínas. 


Transformação de E.coli

21 Março 2017, 17:00 Rita Zilhão

Transformação de E.coli

Preparação de células competentes da estirpe hospedeira E. coli MC1061 pelo método de CaCl2.

Preparação de caixas de meio selectivo (Amp/X-gal). Explicação do tipo de selecção.


Transformação de E.coli

21 Março 2017, 09:00 Rita Zilhão

Transformação de E.coli

Preparação de células competentes da estirpe hospedeira E. coli MC1061 pelo método de CaCl2.

Preparação de caixas de meio selectivo (Amp/X-gal). Explicação do tipo de selecção.