Preparação para transformação de E. coli

17 Março 2023, 14:00 • Rita Zilhão

Preparação de células competentes da estirpe hospedeira E. coli MC1061 pelo método de CaCl₂.

Preparação de caixas de meio seletivo (Amp/X-gal). Explicação do tipo de seleção.

Preparação para transformação de E. coli

17 Março 2023, 10:30 • Rita Zilhão

Preparação de células competentes da estirpe hospedeira E. coli MC1061 pelo método de CaCl₂.

Preparação de caixas de meio seletivo (Amp/X-gal). Explicação do tipo de seleção.

Continuação clonagem de expressão

17 Março 2023, 08:30 • Rita Zilhão

Fusões transcricionais e fusões traducionais. Construção de proteínas híbridas ou de fusão. Tags e genes repórter. Construção de proteínas híbridas ou de fusão. Produção de proteínas recombinantes em E. coli e em leveduras. Colunas de afinidade. Sistemas de deteção e purificação de proteínas. Expressão citoplasmática e expressão periplasmática ou secreção extracelular. Corpos de inclusão.

4. Clonagem de expressão

16 Março 2023, 08:00 • Rita Zilhão

4. Clonagem  de expressão

Sistemas de expressão homóloga e heteróloga de genes. Vantagens e desvantagens da expressão heteróloga em E. coli. Configuração de vetores procarióticos de expressão. Sistemas de expressão induzíveis (P_lac, P_T7; ex. pET system). Elevada eficiência de tradução.

Preparação

14 Março 2023, 09:00 • Rita Zilhão

Preparação de células competentes da estirpe hospedeira E. coli MC1061 pelo método de CaCl₂.

Preparação de caixas de meio seletivo (Amp/X-gal). Explicação do tipo de seleção.