Análise e discussão de resultados

14 Abril 2023, 10:30 • Rita Zilhão

Digestão com EcoRI/PstI dos DNAs dos clones selecionados.

Eletroforese em gel de agarose para confirmação da presença do fragmento de 740 pb nos DNAs recombinantes selecionados

Análise e interpretação dos resultados de sequenciação dos DNAs dos clones selecionados para confirmação da correta inserção do fragmento de 740 pb.

7. Análise dos genes clonados e dos seus produtos

14 Abril 2023, 08:30 • Rita Zilhão

7. Análise dos genes clonados e dos seus produtos

Hibridação Southern e algumas aplicações (ex. DNA fingerprinting).

Hibridação dot-blot (também para RNA). Técnica de footprinting (DNase I). Deteção de interações DNA/proteína. Técnica de retardação em gel (EMSA – electrophoretic mobility shift assay) aplicada ao DNA e RNA.

6. Tecnologia de hibridação e de marcação de sondas

13 Abril 2023, 08:00 • Rita Zilhão

6. Tecnologia de hibridação e de marcação de sondas

O que são técnicas de hibridação de ácidos nucleicos e o seu fundamento. Origem e caracterização das sondas de hibridação de ácidos nucleicos. Os diferentes tipos de sondas.

Sondas homólogas, heterólogas e degeneradas. Condições de hibridação. Temperatura de fusão/desnaturação (Tm – melting temperature). 

Sistemas de marcação: marcação radioactiva e não-radioactiva de DNA. Noções muito gerais sobre marcação de DNA por nick translation, por primers aleatórios e de extremidades 5’ e 3’ do DNA. Como se obtêm sondas de RNA (ribossondas).

Análise e discussão de resultados

4 Abril 2023, 09:00 • Rita Zilhão

Digestão com EcoRI/PstI dos DNAs dos clones selecionados.

Eletroforese em gel de agarose para confirmação da presença do fragmento de 740 pb nos DNAs recombinantes selecionados

Análise e interpretação dos resultados de sequenciação dos DNAs dos clones selecionados para confirmação da correta inserção do fragmento de 740 pb.

Análise e discussão de resultados

3 Abril 2023, 16:30 • Rita Zilhão

Digestão com EcoRI/PstI dos DNAs dos clones selecionados.

Eletroforese em gel de agarose para confirmação da presença do fragmento de 740 pb nos DNAs recombinantes selecionados

Análise e interpretação dos resultados de sequenciação dos DNAs dos clones selecionados para confirmação da correta inserção do fragmento de 740 pb.