Sumários
Introdução Unidade Curricular + Introdução WB/ICC + Problemas WB
22 Fevereiro 2024, 09:00 • Federico Herrera Garcia
Nesta sessão, foi introduzida a estrutura, organização e calendarização da unidade curricular de Bioquímica Experimental IV. Explicaram-se: o comportamento oscilatório da via de NFkB em resposta a TNF alfa e um resumo das vias de NFkB e STAT3; os princípios das técnicas baseadas em anticorpos; o desenho experimental básico que seria seguido nas aulas práticas; uma descrição detalhada das técnicas de Western blotting e Imunocitoquímica que seriam ensinadas nas aulas laboratoriais; os equipamentos que iriamos utilizar e os principios da microscopia de fluorescência (e do trabalho com fluorocromos em geral); e um sumário das estratégias de simulação e análise de dados de ómica. Também se procedeu a resolver uma série de problemas práticos relacionados com a técnica de western blotting.
Desenho Experimental e Ferramentas Moleculares (DEFM) I: Escolha de reagentes adequados e estudo dirigido das vias de NFkB e STAT3
22 Fevereiro 2024, 09:00 • Federico Herrera Garcia
Nesta sessão, os estudantes fizeram pesquisa sobre as vias de NFkB e STAT3 e a sua ativação por TNFalfa em aula, com o fim de obter informação relevante para ser utilizada na introdução e na discussão dos artigos. A informação encontrada foi discutida pela sua possível relevância para o trabalho a desenvolver. Também se investigou nas células HeLa e se fez um exercício para justificar o seu uso em comparação com outras possíveis linhas celulares. Depois de lembrar mais uma vez o desenho experimental e as técnicas que iriamos seguir, se procedeu a procurar anticorpos primários e secundários adequados para realizar as experiências de western blotting e imunocitoquímica; diferentes versões de TNFalfa; médios de cultivo adequados para as células HeLa; e outros reagentes relevantes para esta experiência. Estes reagentes deveriam ser a base para a construção dos métodos do artigo.