Sumários
Análise de Imagem + Escrita de artigos
17 Maio 2024, 14:00 • Federico Herrera Garcia
Nesta sessão, se explicou em detalhe como deviam ser analisadas as imagens de imunocitoquimica e western blotting para obter dados quantitativos através do programa de acesso livre ImageJ/FIJI. Os protocolos também foram disponibilizados no Moodle. Explicaram-se as melhores formas de representar os dados e de organizar as figuras. Também se explicaram os análises estatísticos mais adequados a depender do tipo de dados obtidos e analisados. Explicaram-se as características de um texto científico no formato de um artigo em todo detalhe, incluindo exemplos e exercícios para evitar ambiguidades, redundâncias, falta de claridade, e falta de organização, tanto no texto, como nas figuras.
ICC Sessão 1
16 Maio 2024, 14:00 • Fernanda Murtinheira
Breve introdução ao método de imunocitoquímica.
Explicação do protocolo experimental.
Incubação de células HeLa referência e HeLaSTAT3-/- com TNF-alpha (5 a 60 minutos).
Fixação das células com metanol.
Permeabilização, bloqueio e incubação com anticorpo primário anti-NFkB.
ICC Sessão 2
16 Maio 2024, 09:00 • Fernanda Murtinheira
Incubação das células HeLa referência e HeLaSTAT3-/- com anticorpo secundário.
Coloração dos núcleos com o corante Hoechst 33342.
Montagem das lamelas em lâminas de microscopia.
Explicação dos princípios subjacentes a cada uma das etapas.
Explicação dos princípios por trás da microscopia widefield.
Explicação sobre a utilização do software do microscópio.
Visualização das células ao microscópio.
Aquisição de imagens (50 a 100 células) de cada grupo experimental.
WB Sessão 3
16 Maio 2024, 09:00 • Hugo Miguel Raposo Correia Botelho
Western blotting: incubação de anticorpo secundário, acquisição de imagens de luminescência, densitometria e revisão geral da atividade experimental.