Sumários
L3 - Métodos espectrofotométricos de doseamento de proteínas
29 Abril 2026, 15:00 • Filipa Pedro Costa Santos
Breve introdução sobre os métodos de doseamento proteico a utilizar: Método do Biureto de Método de Lowry, e realização do trabaçho experimental.
Métodos de doseamento de proteínas
29 Abril 2026, 15:00 • Ana Isabel Abrantes Coutinho
Métodos espetrofotométricos de doseamento de proteínas
Enzimas: Princípios da Cinética Enzimática
29 Abril 2026, 11:30 • Ana Isabel Abrantes Coutinho
Conceito de cinética de “estados iniciais”.
Dedução da equação de Michaelis-Menten de acordo com a hipótese do estado estacionário.
Determinação dos parâmetros cinéticos Km (constante de Michaelis) e V (velocidade máxima ou velocidade limite) – Método computacionais (regressão não linear) e método de linearização de Lineweaver-Burk.
Significado dos parâmetros cinéticos: Km, constante de Michaelis, e kcat, constante catalítica ou nº de turnover.
O significado de Km, constante de Michaelis, de acordo com a hipótese do equilíbrio.
Enzimas: Princípios da Catálise Enzimática
28 Abril 2026, 10:00 • Ana Isabel Abrantes Coutinho
Propriedades gerais dos enzimas: eficiência catalítica, especificidade e capacidade de regulação.
Sistema de classificação dos enzimas.
Formação do complexo enzima-substrato: mecanismo de “chave e fechadura” e de “encaixe induzido”.
Cofatores enzimáticos: iões metálicos e coenzimas. Apoenzima e holoenzima. Grupo prostético.
O papel do centro ativo na catálise enzimática.
Estabilização do estado de transição como mecanismo geral da catálise enzimática.
O efeito do pH e da temperatura na atividade enzimática.
Aula da Teórica Prática – Trabalho Prático 3 – L3 – Métodos espectrofotométricos de doseamento de proteínas
24 Abril 2026, 14:00 • Celia Maria Valente Romao
Esta aula laboratorial (L3) teve como objetivo a quantificação de proteína usando dois métodos distintos: o método do Biureto e o método de Lowry.
A amostra biológica utilizada foi clara de ovo, sendo a albumina sérica
bovina (BSA) usada como amostra padrão. Para tal, foram preparadas várias
soluções padrão, cobrindo um intervalo adequado de concentrações de proteína
para cada método. Foram preparadas três condições com a amostra biológica para
garantir que estaria no intervalo de concentrações da solução padrão.
Os ensaios, foram posteriormente analisados por espectroscopia no Visível, usando
um espectrofotómetro ao comprimento de onda específicos de cada método: 540 nm
para o Método do Biureto e 750 nm para o Método de Lowry.